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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

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制備單向缺失DNA片段試劑盒Deletion Kit for Kilo-Sequencing
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價(jià)格（元） 說明書 數(shù)量
Takara 6030 Deletion Kit for Kilo-Sequencing 5 Rxns ￥1,635
 
■ 制品內(nèi)容 (5 次量)
Exonuclease Ⅲ (180 U/μl) 10 μl
Exo Ⅲ Buffer 500 μl
Mung Bean Nuclease (25 U/μl) 20 μl
Mung Bean Nuclease buffer 500 μl
Klenow fragment (2 U/μl) 10 μl
Klenow Buffer 250 μl
Ligation Solution A 500 μl
Ligation Solution B 60 μl
 
■ 制品說明
本制品是對M13mp系列噬菌體載體 (mp18、19) 和pUC系列質(zhì)粒載體 (pUC18、19和pUC118、119) 多克隆位點(diǎn)中插入的數(shù)千個(gè)堿基片段進(jìn)行測序的試劑盒。
同時(shí)本制品也可有效用于DNA片段末端的單向缺失。
本制品是Steven Henikoff法 (Gene (1984)28、351～359) 和Celeste Yanision-Perron法(Gene(1985)33、103～119)的改良品。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 長鏈DNA測序原理
本制品是利用Exonuclease Ⅲ 的3’→5’外切酶活性制作連續(xù)的單向缺失DNA片段的試劑盒。Exonuclease Ⅲ從5’突出末端或平滑末端的3’端連續(xù)降解核苷酸，但對于3’突出末端的降解活性較低?；旧?，插入的目的DNA是被連續(xù)消化的，但測序引物的退火結(jié)合位點(diǎn)通過連接4堿基的3’突出的限制酶切位點(diǎn)而避免被消化。分取不同時(shí)間間隔的Exonuclease Ⅲ反應(yīng)液，用Mung Bean nuclease/buffer cocktail處理，終止Exonuclease Ⅲ反應(yīng)并同時(shí)切斷互補(bǔ)鏈的5’突出末端。使用Klenow Fragment進(jìn)行平滑化后，使用Ligation cocktail進(jìn)行連接環(huán)化，轉(zhuǎn)化到感受態(tài)細(xì)胞中。
 
 

頁面更新：2024-01-31 15:04:50

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