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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

當(dāng)前位置:首頁> 產(chǎn)品選擇指南 > 一般PCR相關(guān)制品 > 特殊用途:多重PCR,防污染等 > 防止PCR反應(yīng)假陽性的試劑盒TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit
防止PCR反應(yīng)假陽性的試劑盒TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價(jià)格(元) 說明書 數(shù)量
Takara 6088 TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit 200 Rxns ¥2,063
 
■ 制品內(nèi)容 (200 次量)
UNG (2 U/μl) 100 μl
dU plus dNTP Mixture* (12.5×) 800 μl
MgCl2 (25 mM) 1 ml
 
* dU plus dNTP Mixture的Na鹽溶液組成如下: dUTP 7.5 mM;dATP 2.5 mM;dGTP 2.5 mM;dCTP 2.5 mM
 
■ 制品說明
PCR是一種非常敏感的DNA擴(kuò)增技術(shù),易受污染影響,PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染會(huì)產(chǎn)生假陽性結(jié)果。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染是End-point PCR方法,特別在食品、環(huán)境檢測中是令人頭痛的問題。
本制品是一種可防止假陽性產(chǎn)生的試劑盒。使用本制品是在PCR反應(yīng)時(shí)以dUTP取代dTTP,并同時(shí)使用對含有dU的DNA具有降解作用的UNG酶 (Uracil-N-glycosylase)。在PCR反應(yīng)前加入U(xiǎn)NG可降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,而對不含尿嘧啶的模板無任何影響,可選擇性水解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物。 UNG的作用原理:在PCR反應(yīng)前25℃、10分鐘反應(yīng)中,UNG酶可水解PCR反應(yīng)液中含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物的尿嘧啶堿基和糖磷酸骨架的N-糖苷鍵,釋放游離尿嘧啶。隨后進(jìn)行95℃、2分鐘熱處理,在UNG酶失活的同時(shí)進(jìn)一步對磷酸骨架水解,從而消除含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物的污染。UNG酶可以作用于單鏈或雙鏈DNA,對RNA無活性。
本試劑盒除含有UNG酶外還附帶含有dUTP的dNTP Mixture以及MgCl2溶液。使用本試劑盒時(shí)請與TaKaRa Taq Hot Start Version (Code No.: R007A/B) 等Pol I 型PCR酶組合使用。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 注意事項(xiàng)
從反應(yīng)液的配制到PCR產(chǎn)物的檢出應(yīng)分別在4個(gè)操作區(qū)操作,操作區(qū)推薦進(jìn)行物理性隔離。
操作區(qū)1:反應(yīng)液的配制及分裝。
操作區(qū)2:樣品的制備。
操作區(qū)3:將樣品添加到反應(yīng)液中。
操作區(qū)4:PCR反應(yīng)及凝膠電泳對PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢出。
為防止污染,除在操作區(qū)4外請避免對PCR擴(kuò)增產(chǎn)物tube進(jìn)行開閉。
 
 

頁面更新:2023-11-01 16:16:10

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