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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

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E.coli蛋白質(zhì)表達感受態(tài)細胞TaKaRa Competent Cells BL21
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價格（元） 說明書 數(shù)量
Takara 9126 TaKaRa Competent Cell BL21 100 μl x 10 ￥357
 
 
■ 制品內(nèi)容
TaKaRa Competent Cells BL21 10 × 100 μl
pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC Medium* 10 × 1 ml
*SOC Medium:          2%
   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
 10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品說明
E.coli BL21來源于B株，為lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型，因此表達的外源蛋白質(zhì)在該體系中具有更高的穩(wěn)定性。本制品有利于外源蛋白質(zhì)的穩(wěn)定表達。
本制品可用于pCold I-IV DNA 和pCold TF DNA的蛋白質(zhì)表達，但不適合于啟動子為T7的蛋白質(zhì)表達體系，如pET系列，因為BL21宿主不表達T7 RNA聚合酶。另外，不建議使用此菌株構(gòu)建或制備質(zhì)粒，因為它不是recA基因缺失型菌株。
注意：本制品不可用于電擊法轉(zhuǎn)化。
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不是-80℃保存，轉(zhuǎn)化效率將會降低?？墒褂酶綆У膒UC19 DNA確認保存細胞的轉(zhuǎn)化效率。不能液氮保存。
 
■ 質(zhì)量控制
轉(zhuǎn)入1 ng 的pUC19 DNA，涂于含有Amp+的選擇培養(yǎng)基進行篩選。
轉(zhuǎn)化效率 : ≥1×106 colonies /μg pUC19 DNA
 
■ Genotype
E.coli BL21: F-, ompT, hsdSB (rB-mB-), gal, dcm
 
■ 注意事項
1. 將感受態(tài)細胞從-80℃冷凍取出后請立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。
2. 當使用100 μl感受態(tài)細胞時，加入不超過10 ng的高純度質(zhì)粒DNA。否則轉(zhuǎn)化效率會降低。
3. 當改變感受態(tài)細胞數(shù)量或tubes類型時，適當調(diào)整反應(yīng)條件。
4. 使用TE buffer溶解純化的質(zhì)粒DNA。DNA溶液如果鹽濃度高，可能會降低轉(zhuǎn)化效率。
5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培養(yǎng)基。此時，轉(zhuǎn)化效率可能會降低。
  ·L-broth : Ingredient per liter water  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
  用1 N NaOH調(diào)整pH到7.5并高壓滅菌。
  ·φb-broth: Ingredient per liter water  
  Tryptone 20 g  
  Yeast extract 5 g  
  MgSO4·7H2O 5 g  
    用1 N KOH調(diào)整pH到7.5并高壓滅菌。
6. 稀釋時，使用SOC培養(yǎng)基。
7. 不建議將解凍的感受態(tài)細胞再次冷凍保存。但是，如果再次凍結(jié)不可避免，將細胞置于干冰/乙醇中迅速冷凍，置于-80℃保存。但是，轉(zhuǎn)化效率可能會降低至少一個數(shù)量級。
 
 

頁面更新：2023-12-21 14:55:12

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