欧美成 人版在线_久久免视看国产_亚洲成l人在线观看线路_久久96热在精品国产网站

我們使用cookie改善您的瀏覽體驗(yàn)并提供有意義的內(nèi)容。請閱讀我們的cookie協(xié)議
收藏我們 在線訂購 CoA查詢
     

機(jī)構(gòu)用戶解決方案

產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

當(dāng)前位置：首頁> 產(chǎn)品選擇指南 > cDNA合成 & 克隆 > 感受態(tài)細(xì)胞 > 伴侶蛋白感受態(tài)細(xì)胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
伴侶蛋白感受態(tài)細(xì)胞套系Chaperone Competent Cell BL21 Series
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價格（元） 說明書 數(shù)量
Takara 9120 Chaperone Competent Cells BL21 Set 1 Set ￥3,073
Takara 9121 Chaperone Competent Cell pG-KJE8/BL21 100 μl × 10 ￥900
Takara 9122 Chaperone Competent Cell pGro7/BL21 100 μl × 10 ￥691
Takara 9124 Chaperone Competent Cell pG-Tf2/BL21 100 μl × 10 ￥1,139
無標(biāo)題文檔  
 
■ 制品內(nèi)容（Code No.: 9120：100 μl × 3 × 6 種）
● Chaperone Competent Cells BL21 Set (Code No.: 9120)
1. Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 3 × 100 μl
2. Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 3 × 100 μl
3. Chaperone Competent Cells pKJE7/BL21 3 × 100 μl
4. Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 3 × 100 μl
5. Chaperone Competent Cells pTf16/BL21 3 × 100 μl
6. TaKaRa Competent Cell BL21 3 × 100 μl
7. pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 1× 10 μl
8. SOC medium* 18 × 1 ml
   
● Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 (Code No.: 9121)
● Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 (Code No.: 9122)
● Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 (Code No.: 9124)
1. Competent Cell 10 × 100 μl
2. pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 1× 10 μl
3. SOC medium* 10 × 1 ml
*SOC medium:       2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
 10 mM   MgSO4
 10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
     
 
■ 制品說明
Chaperone Competent Cell BL21 Series是由五種分別轉(zhuǎn)化一種伴侶蛋白質(zhì)粒 (Chaperone Plasmid Set (Code No.: 3340)) 的Escerichia coli BL21制成的感受態(tài)細(xì)胞。
眾所周知，分子伴侶參與蛋白質(zhì)折疊過程，且人們已經(jīng)通過大量的實(shí)驗(yàn)研究來表明體內(nèi)蛋白折疊機(jī)理。 本制品中含有五種類型的質(zhì)粒(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pG-Tf2、pTf16)，每一種質(zhì)粒都是能有效表達(dá)一組協(xié)同作用、共同參與蛋白折疊的被稱作“Chaperone team”的分子伴侶。靶蛋白與其中一種“Chaperone team”共同表達(dá)，便可增加可溶性蛋白質(zhì)的回收比率，而用通常方法，由于包涵體的形成，這些表達(dá)蛋白質(zhì)常常是不可回收的。
E.coli BL21來源于B株，為Lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型。因此，表達(dá)的外源蛋白質(zhì)在該體系中有更高的穩(wěn)定性。
當(dāng)進(jìn)行靶蛋白與“Chaperone team”共表達(dá)實(shí)驗(yàn)時，通常需要三步：
1. 用伴侶蛋白質(zhì)粒轉(zhuǎn)化宿主E.coli； 2. 用轉(zhuǎn)化體制備感受態(tài)細(xì)胞；3. 用質(zhì)粒轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞并表達(dá)靶蛋白。如果使用本產(chǎn)品，只需一步轉(zhuǎn)化就可構(gòu)建靶蛋白與“Chaperone team”的共表達(dá)體系，因?yàn)槭褂玫?em>E.coli BL21感受態(tài)細(xì)胞已轉(zhuǎn)化有一種伴侶蛋白質(zhì)粒。另外，此感受態(tài)細(xì)胞有五種質(zhì)粒，不含有伴侶蛋白質(zhì)粒的TaKaRa Competent BL21也可作為對照。
每種E.coli BL21感受態(tài)細(xì)胞包括一種伴侶蛋白質(zhì)粒，非常適合pCold DNA系列的表達(dá)。但該產(chǎn)品不適合于啟動子為T7的蛋白質(zhì)表達(dá)體系，如pET系列，因?yàn)?，宿?em>E.coli BL21菌株不表達(dá)T7 RNA聚合酶。
注意：本產(chǎn)品不可用于電擊法轉(zhuǎn)化。
 
■ DNA序列
  pG-KJE8 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pGRO7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pG-TF2 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pKJE7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pTf16 DNA (Fasta形式的txt文件)
 
■ 保存
-80℃。
注意：如果不是-80℃保存，轉(zhuǎn)化效率將會降低。此時，可在使用前用附帶的pUC19做轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)轉(zhuǎn)化效率。不能保存在液氮中。
 
■ 轉(zhuǎn)化效率
Chaperone competent cells：轉(zhuǎn)化1 ng pUC19，涂于Cm+和Amp+平板上進(jìn)行篩選。
TaKaRa competent cell BL21：轉(zhuǎn)化1 ng pUC19，涂于Amp+平板上進(jìn)行篩選。
轉(zhuǎn)化效率≥1×106 cfu/μg pUC19
 
■ Genotype
E.coli BL21 : F-, ompT, hsdSB (rB-mB-), gal, dcm
 
■ 注意事項
1. 從-80℃中只取出實(shí)驗(yàn)所用的感受態(tài)細(xì)胞，然后立即放入干冰/EtOH bath。開始實(shí)驗(yàn)前不要取出。
2. 可使用1.5 ml microtube替代FALCON tube，但可能會降低效率。
3. 使用100 μl感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化時，高純度DNA使用量不要超過10 ng，否則轉(zhuǎn)化效率會降低。
4. 轉(zhuǎn)化體系改變 (如感受態(tài)細(xì)胞使用量發(fā)生改變) ,或換用了其它tube等，需研討轉(zhuǎn)化條件 (如使用一般的1.5 ml tube時，請于42℃保溫60秒)。
5. 除SOC培養(yǎng)基外，L-broth及φb-broth也可使用，但轉(zhuǎn)化效率會有所下降。
6. 稀釋時，使用SOC培養(yǎng)基。
7. L-broth plate : 成份 per liter  
  Tryptone 10 g  
  Yeast extract 5 g  
  NaCl 5 g  
    用1N NaOH調(diào)整到pH7.5，添加agar到1.5%，高壓滅菌。
8. 不建議將解凍的感受態(tài)細(xì)胞再次冷凍保存。如果再次凍結(jié)不可避免，將細(xì)胞置于干冰/乙醇中迅速冷凍，置于-80℃保存。但是，轉(zhuǎn)化效率可能會降低至少一個數(shù)量級。
9. 本制品中含有的伴侶蛋白質(zhì)粒帶有來源于pACYC的復(fù)制起點(diǎn)和氯霉素抗性基因 (Cmr)，E.coli表達(dá)系統(tǒng)中可以使用常用的ColE1型、具氨芐抗性 (Ampr)篩選標(biāo)記的表達(dá)載體，但不可與含有氯霉素抗性基因的表達(dá)質(zhì)粒共同使用。
 

頁面更新：2023-12-01 16:19:25

瀏覽此產(chǎn)品的客戶還對以下信息感興趣