PrimeScript II Reverse Transcriptase在42℃條件下能夠有效地合成低背景、高質(zhì)量的cDNA,無需進行高溫反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),高溫的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)會導(dǎo)致RNA的降解,且由于引物的有效使用和輔助蛋白質(zhì)的添加,避免了因RNA二級結(jié)構(gòu)對cDNA合成的抑制及RT引物錯配引起的非特異性延伸。輔助蛋白質(zhì)完全抑制了由于反轉(zhuǎn)錄酶冰上放置引起的非特異性延伸反應(yīng),因此,即便是反應(yīng)液配制到反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)開始要間隔一段時間,也不會抑制長鏈cDNA的合成。合成的cDNA可以廣泛應(yīng)用于2nd-strand合成、雜交、終點PCR和定量PCR,而且本酶特別適用于全長cDNA文庫構(gòu)建用的高質(zhì)量cDNA合成等。 |
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■ 保存 |
-20℃。 |
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■ 起源 |
Purified from an E. coli strain expressing a recombinant enzyme. |
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■ 活性定義 |
以poly (rA) ·oligo (dT)12-18 為模板/引物,在37℃的條件下,10分鐘內(nèi)摻入1 nmol [3H] dTTP所需要的酶量定義為1個活性單位(unit)。 |
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■ 用途 |
1st-Strand cDNA的合成。
·cDNA Probe的制備。
·RT-PCR。 |
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