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■ 識別位點 |
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■ 制品內(nèi)容 |
□ 附帶緩沖液 |
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10X QuickCut Buffer |
500 μl |
10X QuickCut Green Buffer |
500 μl |
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■ 制品說明 |
□ 起源:Escherichia coli carrying the plasmid encoding Dpn I gene |
□ 反應(yīng)溫度:37℃ |
□ 活性測定用底物:pBR322 |
□ 活性檢測:1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反應(yīng)體系中,在37℃條件下,經(jīng)過5 min反應(yīng),將1 μg pBR322消化所需要的酶量。 |
□ 甲基化的影響:不受CG methylase的影響,也不受dam methylase的影響。能夠切斷腺嘌呤甲基化的GmATC序列;不能切斷非甲基化的GATC序列;腺嘌呤hemi-methylated的GmATC序列,只能部分切斷。 |
□ 使用注意:
1) 不建議進(jìn)行16 hr以上酶切,易導(dǎo)致星活性。
2) 使用QuickCut限制酶進(jìn)行雙酶切或多酶切反應(yīng)時,加入限制酶的總體積不能超過反應(yīng)體系的1/10量;如果各酶的反應(yīng)溫度不同,建議按低溫到高溫的順序加入相應(yīng)的QuickCut限制酶進(jìn)行分步酶切反應(yīng)。
3) 10X QuickCut Green Buffer可能會干擾酶切產(chǎn)物的熒光分析。因此,酶切產(chǎn)物熒光分析檢測時推薦使用無色的10X QuickCut Buffer。
4) 10X QuickCut Green Buffer如出現(xiàn)沉淀,室溫下振蕩5分鐘可使沉淀完全溶解,不影響使用。 |
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