| |
| |
|
| |
| |
| ■ 識(shí)別位點(diǎn) |
 |
| |
| ■ 制品內(nèi)容 |
| □ 附帶試劑 |
|
| 10X QuickCut Buffer |
500 μl |
| 10X QuickCut Green Buffer |
500 μl |
|
| |
| ■ 制品說明 |
| □ 起源：Proteus vulgaris |
| □ 反應(yīng)溫度：37℃ |
| □ 活性檢測(cè)：1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反應(yīng)體系中，在37℃條件下，經(jīng)過5 min反應(yīng)，將1 μg λ DNA完全消化所需要的酶量。 |
| □ 活性測(cè)定用底物：λ DNA |
| □ Star活性：Mn2+存在條件下，識(shí)別序列會(huì)發(fā)生變化 |
□ 質(zhì)量控制：
1) 功能檢測(cè)：
在1 μg線性DNA中加入1 μl QuickCut限制酶，在50 μl反應(yīng)體系中，37℃保溫5 min，能完全消化線性DNA。
2) Star Activity Test：
在1 μg DNA中加入1 μl QuickCut限制酶，進(jìn)行16 hr酶切反應(yīng)，然后進(jìn)行瓊脂糖電泳，DNA片段的電泳譜帶不發(fā)生變化。
3) Labeled Oligonucleotide Assay (LOA) Test：
在熒光標(biāo)記的寡核苷酸中加入1 μl QuickCut限制酶，37℃保溫1 hr，分解率小于10%。 |
| □ 甲基化的影響：受CG methylase的影響，但不受dam metyhlase的影響。 |
□ 使用注意：
1) 因該酶切出的突出末端比一般的2個(gè)堿基突出末端的連接效率低，所以必須使用平滑末端的連接條件。
2) 不建議進(jìn)行16 hr以上酶切，易導(dǎo)致星活性。
3) 使用QuickCut限制酶進(jìn)行雙酶切或多酶切反應(yīng)時(shí)，加入限制酶的總體積不能超過反應(yīng)體系的1/10量；如果各酶的反應(yīng)溫度不同，建議按低溫到高溫的順序加入相應(yīng)的QuickCut限制酶進(jìn)行分步酶切反應(yīng)。
4) 10X QuickCut Green Buffer可能會(huì)干擾酶切產(chǎn)物的熒光分析。因此，酶切產(chǎn)物熒光分析檢測(cè)時(shí)推薦使用無色的10X QuickCut Buffer。
5) 10X QuickCut Green Buffer如出現(xiàn)沉淀，室溫下振蕩5分鐘可使沉淀完全溶解，不影響使用。 |
| |
| |
京公網(wǎng)安備 110114000405號(hào)
增目的片段（灰）.png)
物純化（灰）.png)
化感受態(tài)細(xì)胞（灰）.png)
