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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

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AAV病毒純化 AAVpro® Cell & Sup. Purification Kit Maxi (All Serotypes)
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價(jià)格（元） 說(shuō)明書(shū) 數(shù)量
Takara 6676 AAVpro® Cell & Sup. Purification Kit Maxi (All Serotypes) 4 preps ￥7,580
Takara 6677 AAVpro® Cell & Sup. Extraction/Concentration Pack Maxi (All Serotypes) 1 Kit ￥4,683
Takara 6678 AAVpro® Purification Pack Maxi (All Serotypes) 4 preps ￥4,189
無(wú)標(biāo)題文檔
 
■ 制品內(nèi)容
AAVpro Cell & Sup. Purification Kit Maxi (All Serotypes) （Code No. 6676）
AAVpro Cell & Sup. Extraction/Concentration Pack Maxi (All Serotypes) 6677
AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes) 6678
 
AAVpro Cell & Sup. Extraction/Concentration Pack Maxi (All Serotypes)（Code No. 6677）
AAV Extraction Solution C 8 ml
AAV Extraction Solution D 32 ml
AAV Extraction enhancer 80 ml
Concentrating solution*1 115 ml×2
Dissolving solution 50 ml
 
AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes)（Code No. 6678）
Precipitator*2 5 ml
Precipitator B 2.5 ml
Millex-HV 0.45 μm 4個(gè)
Amicon Ultra-15, 100 kDa 4個(gè)
Suspension Buffer 60 ml×2
Cryonase Cold-active Nuclease 500 μl
 
*1 Concentrating solution4℃保存時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生沉淀，不影響制品的品質(zhì)和性能。產(chǎn)生沉淀時(shí)， 請(qǐng)于40℃水浴中加熱使其完全溶解后再使用。
*2 Precipitator A低溫保存時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生白色沉淀，不影響制品的品質(zhì)和性能。產(chǎn)生沉淀時(shí)，請(qǐng)于37℃水浴中加熱使其完全溶解后再使用。
 
Limited Use Label License: [M88]
 
■ 制品說(shuō)明
用于同時(shí)從包裝細(xì)胞和培養(yǎng)上清液中純化AAV病毒
· 適用于各種AAV血清型
· 高純度、高回收率
· 特別的AAV提取方法，不需要凍融或者超聲波破碎等耗時(shí)操作
· 無(wú)需進(jìn)行超速離心等繁瑣操作
· 附帶純化AAV病毒所需要的所有Buffer
 
腺相關(guān)病毒（AAV）能夠?qū)⒒驅(qū)胫猎鲋臣?xì)胞和非增殖細(xì)胞中，在非分裂細(xì)胞中可以實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期表達(dá)。此外，由于它具有低免疫原性，也適合作為動(dòng)物個(gè)體基因?qū)耄?em>in vivo transduction）工具。當(dāng)使用AAV進(jìn)行動(dòng)物個(gè)體基因?qū)霑r(shí)，使用高純度的病毒粒子是很有必要的，需要去除源自病毒包裝細(xì)胞和培養(yǎng)基的雜質(zhì)。在向培養(yǎng)細(xì)胞導(dǎo)入基因時(shí)，使用純化后的AAV可以消除雜質(zhì)所帶來(lái)的影響。
 
AAV病毒的純化通常使用氯化銫密度梯度超速離心法或碘克沙醇超速離心法，但這兩種方法不僅需要熟練的操作手法，同時(shí)還存在耗時(shí)長(zhǎng)和回收率低等問(wèn)題。
 
AAVpro Cell & Sup. Purification Kit Maxi (All Serotypes)可在大約7小時(shí)內(nèi)從包裝細(xì)胞及其培養(yǎng)上清液中純化AAV病毒，而且適用于各種血清型。該試劑盒中包含特別的AAV病毒提取方法，不需要像凍融法和超聲波破碎法那樣繁瑣的操作。AAVpro Cell & Sup. Purification Kit Maxi (All Serotypes)（Code No. 6676）由AAVpro Cell & Sup. Extraction/Concentration Pack Maxi (All Serotypes) (Code No. 6677)和AAVpro Purification Pack Maxi(All Serotypes) (Code No. 6678)組成。本制品包含4次AAV病毒純化所需要的緩沖液和純化柱，每次可以純化5個(gè)T225培養(yǎng)瓶收集的包裝細(xì)胞和培養(yǎng)上清液中的AAV病毒。
 
■ 保存
AAVpro Cell & Sup. Extraction/Concentration Pack Maxi (All Serotypes)（Code No. 6677）
  Concentrating solution 4℃
  其它組份 室溫
 
AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes)（Code No. 6678）
  Cryonase Cold-active Nuclease －20℃
  其它組份 室溫
 
■ 實(shí)驗(yàn)例
＜1. 純化后AAV純度測(cè)定＞
使用本制品，從5個(gè)T225培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的包裝細(xì)胞中純化攜帶熒光蛋白質(zhì)ZsGreen1的各血清型(AAV1、AAV2、AAV5、AAV6)AAV病毒。純化后的AAV病毒使用AAVpro Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2（Code No. 6233）測(cè)定病毒滴度，以1× 109 vector genome (vg)/lane上樣進(jìn)行SDS-PAGE。結(jié)果顯示，SDS-PAGE上的主要條帶為AAV衣殼蛋白(VP1、VP2、VP3)。
 
 
＜2. 純化后AAV載體感染性能評(píng)價(jià)＞
使用通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)例「1. 提取純化后AAV（各種血清型）純度測(cè)定」獲得的各種血清型AAV，感染293T細(xì)胞和HeLa細(xì)胞，評(píng)估其感染滴度。純化后的AAV以50,000 vg/cell分別感染293T細(xì)胞和HeLa細(xì)胞，3天后進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析。分析確認(rèn)，使用本制品純化的AAV依然保持其感染能力。
 
 
 

頁(yè)面更新：2025-01-10 10:14:25

使用文獻(xiàn)

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