快速、高靈敏度的qPCR新冠病毒檢測解決方案 |
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2020年,新冠肺炎疫情在全球快速蔓延,準(zhǔn)確地對新冠病毒進(jìn)行檢出至關(guān)重要。通過qPCR方法進(jìn)行核酸檢測,是判斷是否攜帶病毒、是否具有傳染性的“金標(biāo)準(zhǔn)”。
Takara作為眾多檢測試劑盒生產(chǎn)廠商的長期合作伙伴,能夠提供【探針/引物合成 +核酸提取 + qPCR試劑 + 防污染措施】在內(nèi)的完整的qPCR檢測解決方案。
尤其是Takara探針法One Step RT-qPCR家族,以第三方認(rèn)可的高靈敏度、小于20分鐘的快速qPCR反應(yīng)、無需RNA提取的直接qPCR技術(shù),獲得了全球科研人員的青睞。
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Takara探針法One Step RT-qPCR家族,
檢測靈敏度和速度
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20分鐘檢測成為可能——方便的預(yù)混型試劑One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)(Code No. RR600/601) |
· 預(yù)混型試劑,僅需添加引物、探針、模板,操作簡單,降低污染風(fēng)險(xiǎn)。
· 使用新型的 PrimeScript III 反轉(zhuǎn)錄酶,高特異性、高延伸性、高耐熱性(55℃)。
· 20分鐘檢測,甚至更快 |
√ 2020年11月,英國科學(xué)家在《Nature》旗下《Scientific Reports》期刊發(fā)表文章《CoV2-ID, a MIQE-compliant sub-20-min 5-plex RT-PCR assay targeting SARS-CoV-2 for the diagnosis of COVID-19》,文中使用了RR600進(jìn)行了快速protocol的優(yōu)化,【1分鐘反轉(zhuǎn)錄+1秒變性+1秒退火/延伸】的反應(yīng)設(shè)置,整體反應(yīng)時(shí)間控制在20分鐘以內(nèi),并在多種儀器上都顯示了良好的結(jié)果,并有潛力實(shí)現(xiàn)更短時(shí)間的檢測。
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· 第三方評測的高靈敏度
2020年4月17日,英國科學(xué)家在bioRxiv預(yù)印本平臺(tái)發(fā)表文獻(xiàn)《Comparison of SARS-CoV2 N gene real-time RT-PCR targets and commercially available mastermixes》。作者比較了四種主流的RT-qPCR試劑對于新冠病毒的檢測能力,結(jié)果顯示:在最低檢出界限方面,Takara One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix(Code No. RR600)表現(xiàn)最為出色。 |
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文獻(xiàn)詳細(xì)解讀請參考新聞:第三方評測: 新冠病毒檢測,Takara qPCR試劑表現(xiàn)出色 |
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經(jīng)典產(chǎn)品,被大量檢測機(jī)構(gòu)選擇——One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(Code No. RR064A) |
· 反轉(zhuǎn)錄、qPCR在同一管中連續(xù)進(jìn)行的一步(One Step)法試劑,操作簡單,并能有效防止污染。
· 疫情初期,中國疾病預(yù)防控制中心等權(quán)威機(jī)構(gòu)發(fā)布了鑒定新型冠狀病毒的文獻(xiàn)《A Novel Coronavirus from Patients with Pneumonia in China, 2019》,文章中使用了該產(chǎn)品進(jìn)行新冠病毒的qPCR檢測。
· Takara實(shí)驗(yàn)例,同其他公司制品相比,可在短時(shí)間內(nèi)完成qPCR分析,RR064可在41分鐘內(nèi)完成解析。
· 經(jīng)客戶優(yōu)化反應(yīng)體系和反應(yīng)條件,新冠病毒qPCR檢測可在30分鐘內(nèi)完成。 |
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無需RNA純化,先進(jìn)的直接qPCR技術(shù)——PrimeDirect® Probe RT-qPCR Mix (or with UNG)(Code No.RR650/651) |
· 無需RNA提取,血液、尿液等樣品可直接加入到反應(yīng)液中進(jìn)行qPCR檢測。
· 在新冠肺炎疫情下,無需RNA提取即可進(jìn)行新冠病毒核酸檢測,可以大大緩解人力、時(shí)間等壓力。
· 2020年8月,德國科學(xué)家在《Journal of Clinical Virology》發(fā)表了題為《Extraction-free SARS-CoV-2 detection by rapid RT-qPCR universal for all primary respiratory materials》的文獻(xiàn),文章中作者以PrimeDirect Probe RT-qPCR Mix(Code No.RR650)為基礎(chǔ),研發(fā)了無需RNA提取、直接進(jìn)行新冠病毒qPCR檢測的方法。 |
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· 杜塞爾多夫醫(yī)院目前正在使用這種檢測方法,在與感染患者接觸的醫(yī)生和工作人員中頻繁地篩查COVID-19,這對于防止感染的局部傳播至關(guān)重要。 |
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·文獻(xiàn)詳細(xì)解讀請參考新聞:無需RNA純化,生物樣本直接qPCR—新冠病毒檢測 |
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疫情初期,Takara除了快速反應(yīng)為廣大檢測機(jī)構(gòu)和公司提供了大量檢測原料外, Takara還研討了使用上述產(chǎn)品對新冠病毒進(jìn)行檢測的結(jié)果,驗(yàn)證了檢測靈敏度、擴(kuò)增情況、多重PCR的實(shí)驗(yàn)條件等內(nèi)容。檢測結(jié)果請參考新聞: |
Takara有擔(dān)當(dāng):提供完善的新冠病毒檢測體系和研討數(shù)據(jù) |
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新冠疫情爆發(fā)以來,已經(jīng)有上千篇新冠病毒研究的文獻(xiàn)中使用了Takara產(chǎn)品,其中,有50余篇發(fā)表在影響因子大于30的高水平期刊上。涉及到定量PCR、核酸提取、引物探針、序列調(diào)取、病毒滴度測定、表達(dá)系統(tǒng)等多個(gè)產(chǎn)品線。其中,使用Takara qPCR產(chǎn)品的文獻(xiàn)數(shù)量約占1/3。相關(guān)信息請參考新聞: |
萬篇文獻(xiàn)供參考,Takara是您值得信賴的科研伙伴 |
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Takara為您提供新冠病毒檢測完整解決方案 |
產(chǎn)品 |
Code No. |
包裝量 |
用途 |
DNA-OFF® |
9036 |
500 ml |
去除實(shí)驗(yàn)區(qū)域DNA污染 |
RNase-OFF® |
9037 |
500 ml |
去除RNase污染 |
TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0 |
9766 |
50 次 |
柱式法病毒核酸提取 |
RNAiso Plus |
9108/9109 |
100/200 ml |
試劑型Total RNA提取 |
One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) |
RR064A/B |
100/500 次 (50 μl反應(yīng)) |
probe法One Step RT-qPCR |
PrimeDirect® Probe RT-qPCR Mix |
RR650A/B |
200/1,000 次(25 μl反應(yīng)) |
無需RNA純化,直接進(jìn)行probe法One Step RT-qPCR |
PrimeDirect® Probe RT-qPCR Mix, with UNG |
RR651A/B |
200/1,000 次(25 μl反應(yīng)) |
RR650的UNG版本,防止假陽性 |
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix |
RR600A/B |
200/1,000 次(25 μl反應(yīng)) |
完全premix型probe法One Step RT-qPCR |
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG |
RR601A/B |
200/1,000 次(25 μl反應(yīng)) |
RR600的UNG版本,防止假陽性 |
Uracil DNA Glycosylase (UNG), heat-labile |
2820 |
200 U |
防止Carryover污染導(dǎo)致的假陽性 |
dU plus dNTP Mixture (12.5×) |
4035 |
800 μl |
防止Carryover污染導(dǎo)致的假陽性 |
dNTP Mixture |
4030 |
各3.2 μmol/1.28 ml |
PCR底物 |
dNTP Mixture |
4019 |
各2.5 μmol/250 μl |
PCR底物 |
Reverse Transcriptase M-MLV (RNase H-) |
2641A/B |
10,000/40,000 U |
反轉(zhuǎn)錄酶 |
Recombinant RNase Inhibitor |
2313A/B |
5,000/25,000 U |
RNase抑制劑 |
T7 RNA Polymerase |
2540A/B |
5,000 U/25,000 U |
RNA標(biāo)準(zhǔn)品的體外轉(zhuǎn)錄 |
RNase-free Water |
9012 |
1 ml×10 支 |
RNA實(shí)驗(yàn)用水 |
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除上述目錄產(chǎn)品外,Takara不斷完善病毒檢測方案,提供WHO、中國疾病預(yù)防控制中心公布指導(dǎo)的引物探針套裝、美國疾病控制與預(yù)防中心公布指導(dǎo)的引物探針套裝。
同時(shí),引物探針套裝中還增加了所有檢測靶點(diǎn)Control RNA產(chǎn)品。 |
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一、新型冠狀病毒(2019-nCoV)ORF1ab基因、E蛋白基因、N蛋白基因檢測套裝: |
序號 |
Primer/Probe名稱* |
堿基序列 (方向?yàn)?' to 3')* |
5'修飾 |
3'修飾 |
Control RNA** |
01 |
2019-nCoV RdRP_SARSr-F2 |
GTG ARA TGG TCA TGT GTG GCG G |
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Ger-RdRP |
02 |
2019-nCoV RdRP_SARSr-R1 |
CAR ATG TTA AAS ACA CTA TTA GCA TA |
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03 |
2019-nCoV RdRP_SARSr-P2 |
CAG GTG GAA CCT CAT CAG GAG ATG C |
FAM |
BHQ-1 |
04 |
2019-nCoV RdRP_SARSr-P1 |
CCA GGT GGW ACR TCA TCM GGT GAT GC |
FAM |
BHQ-1 |
05 |
2019-nCoV E_Sardeco-F1 |
ACA GGT ACG TTA ATA GTT AAT AGC GT |
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Ger-E |
06 |
2019-nCoV E_Sardeco-R2 |
ATA TTG CAG CAG TAC GCA CAC A |
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07 |
2019-nCoV E_Sardeco-P1 |
ACA CTA GCC ATC CTT ACT GCG CTT CG |
FAM |
BHQ-1 |
08 |
2019-nCoV N_Sarbeco_F1 |
CAC ATT GGC ACC CGC AAT C |
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Ger-N |
09 |
2019-nCoV N_Sarbeco_R1 |
GAG GAA CGA GAA GAG GCT TG |
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10 |
2019-nCoV N_Sarbeco_P1 |
ACT TCC TCA AGG AAC AAC ATT GCC A |
FAM |
BHQ-1 |
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二、新型冠狀病毒(2019-nCoV)ORF1ab/N基因檢測套裝: |
序號 |
Primer/Probe名稱* |
堿基序列 (方向?yàn)?' to 3')* |
5'修飾 |
3'修飾 |
Control RNA** |
11 |
2019-nCoV nsp14F |
TGG GGY TTT ACR GGT AAC CT |
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HK-ab1 |
12 |
2019-nCoV nsp14R |
AAC RCG CTT AAC AAA GCA CTC |
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13 |
2019-nCoV nsp14P |
TAG TTG TGA TGC WAT CAT GAC TAG |
FAM |
TAMRA |
14 |
2019-nCoV NF |
TAA TCA GAC AAG GAA CTG ATT A |
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HK-N |
15 |
2019-nCoV NR |
CGA AGG TGT GAC TTC CAT G |
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16 |
2019-nCoV NP |
GCA AAT TGT GCA ATT TGC GG |
FAM |
TAMRA |
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根據(jù)中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所公布指導(dǎo),Takara提供一個(gè)qPCR引物探針套裝: |
序號 |
Primer/Probe名稱* |
堿基序列 (方向?yàn)?' to 3')* |
5'修飾 |
3'修飾 |
Control RNA** |
17 |
CDC 2019-nCoV ORF1ab-F |
CCCTGTGGGTTTTACACTTAA |
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CDC-ORF1ab |
18 |
CDC 2019-nCoV ORF1ab-R |
ACGATTGTGCATCAGCTGA |
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19 |
CDC 2019-nCoV ORF1ab-P |
CCGTCTGCGGTATGTGGAAAGGTTATGG |
FAM |
BHQ-1 |
20 |
CDC 2019-nCoV N-F |
GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT |
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CDC-N |
21 |
CDC 2019-nCoV N-R |
CAGACATTTTGCTCTCAAGCTG |
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22 |
CDC 2019-nCoV N-P |
TTGCTGCTGCTTGACAGATT |
FAM |
TAMRA |
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根據(jù)美國疾病控制與預(yù)防中心公布指導(dǎo),Takara提供一個(gè)qPCR引物探針套裝: |
序號 |
Primer/Probe名稱* |
堿基序列 (方向?yàn)?' to 3')* |
5'修飾 |
3'修飾 |
Control RNA** |
23 |
US CDC 2019-nCoV_N1-F |
GACCCCAAAATCAGCGAAAT |
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US-N1 |
24 |
US CDC 2019-nCoV_N1-R |
TCTGGTTACTGCCAGTTGAATCTG |
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25 |
US CDC 2019-nCoV_N1-P |
ACCCCGCATTACGTTTGGTGGACC |
FAM |
BHQ-1 |
26 |
US CDC 2019-nCoV_N2-F |
TTACAAACATTGGCCGCAAA |
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US-N2 |
27 |
US CDC 2019-nCoV_N2-R |
GCGCGACATTCCGAAGAA |
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28 |
US CDC 2019-nCoV_N2-P |
ACAATTTGCCCCCAGCGCTTCAG |
FAM |
BHQ-1 |
29 |
US CDC 2019-nCoV_N3-F |
GGGAGCCTTGAATACACCAAAA |
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US-N3 |
30 |
US CDC 2019-nCoV_N3-R |
TGTAGCACGATTGCAGCATTG |
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31 |
US CDC 2019-nCoV_N3-P |
AYCACATTGGCACCCGCAATCCTG |
FAM |
BHQ-1 |
32 |
US CDC RP-F(內(nèi)參檢測用) |
AGATTTGGACCTGCGAGCG |
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33 |
US CDC RP-R(內(nèi)參檢測用) |
GAGCGGCTGTCTCCACAAGT |
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34 |
US CDC RP-P(內(nèi)參檢測用) |
TTCTGACCTGAAGGCTCTGCGCG |
FAM |
BHQ-1 |
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*所有引物探針為HPLC純化級別,客戶可以根據(jù)需要選擇合適的套裝。 |
**Control RNA產(chǎn)品需單獨(dú)訂購,訂購時(shí)請咨詢各地代理商。 |
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Takara還可以提供使用簡便、性價(jià)比高、可靠的Real Time PCR儀Thermal Cycler Dice Real Time System III (Code No. TP950)。 除具有以往Takara PCR儀受到好評的友好操作軟件外,還搭載觸摸屏控制面板,可進(jìn)行單機(jī) (獨(dú)立) 操作,以追求操作簡便性。 |
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特點(diǎn)介紹: |
◇ 搭載觸摸屏,可獨(dú)立操作,支持英語/日語界面,儀器軟件更加追求操作簡便性。
◇ 可做高速定量PCR反應(yīng)。
使用嵌合熒光染料檢測法時(shí),與試劑TB Green Fast qPCR Mix(Code No. RR430)搭配使用,TP950可完成快速定量PCR反應(yīng)。
◇ 專為科研用戶設(shè)計(jì)的便于操作的定量軟件。 |
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