本制品是利用固定化RNase A親和層析的方法,從豬肝中提純的。該酶的特征與人胎盤來源的此類酶相似,與RNase A形成1:1復(fù)合體,對(duì)RNase表現(xiàn)高度的非競爭性抑制 (Ki=4×10-10 M) 。該反應(yīng)是可逆的,通過尿素及巰基類試劑能夠解離復(fù)合體,使RNase復(fù)性而抑制劑不可逆失活。使用時(shí)可直接加入含有RNA的反應(yīng)液中。本品屬蛋白質(zhì)性質(zhì),與其它競爭性抑制劑 (核酸類、無機(jī)磷酸類) 不同,可以很容易地通過苯酚處理將其從反應(yīng)體系中除去。但不能抑制反轉(zhuǎn)錄酶的RNase H的活性。本品具有與人胎盤來源的酶相同的應(yīng)用。
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■ 保存 |
-20℃。 |
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■ 起源 |
Porcine liver |
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■ 活性定義 |
抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位 (U)。(抑制活性通過抑制RNase A水解Cyclic2’,3’-CMP的能力確定) 。 |
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■ 使用注意 |
1. 抑制RNase活性的pH值范圍較廣,在pH7~8時(shí)表現(xiàn)最適范圍。
2. RNase Inhibitor發(fā)揮活性作用需要至少1 mM的DTT。 |
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■ 用途 |
1. cDNA合成反應(yīng) (Ribonuclease Inhibitor, 反應(yīng)量0.5 U/μl) 。
2. 體外翻譯 (Ribonuclease Inhibitor, 反應(yīng)量1 unit/μl) 。
3. 體外無細(xì)胞系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄 (Ribonuclease Inhibitor, 反應(yīng)量20 U/μl) 。
4. SP6或T7 RNA聚合酶的體外轉(zhuǎn)錄 (Ribonuclease Inhibitor,反應(yīng)量1 unit/μl) 。
5. 多核糖體分離(RNase Inhibitor,反應(yīng)量1 unit/μl)。 |