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| Takara慢病毒基因?qū)胂到y(tǒng)解決方案 |
病毒基因?qū)胂到y(tǒng)已被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)眾多研究領(lǐng)域，在被寄予厚望的細(xì)胞和基因治療研究中，病毒基因?qū)肫脚_也已經(jīng)成為主要的基因?qū)胧侄巍?/strong>目前常用的病毒載體包括慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺相關(guān)病毒、腺病毒等等，這些病毒載體各有特點，使用也有所不同，需要根據(jù)目標(biāo)對象（培養(yǎng)細(xì)胞、動物個體）、希望的基因表達(dá)方式（瞬時，穩(wěn)定），結(jié)合實驗?zāi)康倪x擇合適的病毒載體。 慢病毒是目前使用較多的病毒基因?qū)胂到y(tǒng)，也是細(xì)胞與基因療法研究，尤其是CAR-T治療，所使用的主要基因?qū)肫脚_。慢病毒是單鏈RNA病毒，一般以人免疫缺陷病毒（HIV-1）為基礎(chǔ)開發(fā)的居多，可用于絕大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞基因?qū)?，包括使用逆轉(zhuǎn)錄病毒難以實現(xiàn)的造血干細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞等在內(nèi)的非分裂細(xì)胞。使用重組慢病毒導(dǎo)入的目的基因也可以整合到宿主細(xì)胞的基因組中，可實現(xiàn)長期穩(wěn)定的基因表達(dá)。 |
| 慢病毒表達(dá)載體 |
慢病毒表達(dá)載體是所有慢病毒基因?qū)胂到y(tǒng)的關(guān)鍵參與者。野生型慢病毒基因組約為9.7 kb（包含兩個LTR）。人工構(gòu)建大于此長度的基因組，將導(dǎo)致產(chǎn)生不穩(wěn)定的病毒粒子和病毒滴度的明顯下降。對于慢病毒表達(dá)載體來說，大部分病毒基因組已經(jīng)被其他有用的序列所取代，如篩選標(biāo)記或熒光蛋白質(zhì)基因，但仍有足夠的空間用于目的基因克隆。 由于每個慢病毒表達(dá)載體含有的有用序列不同，因此克隆轉(zhuǎn)基因的可用空間也有所不同。經(jīng)過優(yōu)化的慢病毒表達(dá)載體，除了含有HIV-1 LTR和慢病毒包裝信號（Ψ），也會包含一些特定元件（cPPT/CTS，RRE，WPRE），這些特定元件的存在有助于改善轉(zhuǎn)基因表達(dá)、病毒滴度和整體慢病毒載體功能。 |
| 慢病毒包裝制備 |
使用重組慢病毒的生物安全問題是，可能會產(chǎn)生致癌病毒或具有復(fù)制能力的重組慢病毒(RCL)。然而這些擔(dān)憂，可以通過仔細(xì)考慮轉(zhuǎn)基因插入物的性質(zhì)，并確保病毒復(fù)制僅限于發(fā)生在提供這些基本功能的特定包裝細(xì)胞中，而得到大大緩解。因此，重組慢病毒可以安全使用，是將外源性遺傳物質(zhì)單向轉(zhuǎn)移到靶細(xì)胞的有用工具。重組慢病毒的包裝細(xì)胞一般為HEK 293T細(xì)胞，選擇易于轉(zhuǎn)染并能夠高水平表達(dá)病毒蛋白的HEK 293T細(xì)胞，更有利于獲得高病毒滴度。 |
| 慢病毒一般實驗流程 |
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| End-to-end解決方案 |
| Takara Bio提供end-to-end慢病毒基因?qū)胂到y(tǒng)解決方案，一站式解決你的產(chǎn)品需求，讓你的研究進展快人一步。 |
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| 慢病毒表達(dá)載體 |
Lentiviral vector systems
表達(dá)載體骨架類型豐富，選擇多樣 我們?yōu)樵S多應(yīng)用提供多種高度優(yōu)化的慢病毒載體，這些慢病毒載體是所有Lenti-X基因傳遞系統(tǒng)的關(guān)鍵參與者，可用于大部分哺乳動物細(xì)胞類型，包括分裂和非分裂細(xì)胞，原代細(xì)胞培養(yǎng)物，干細(xì)胞和神經(jīng)元。  |
| 慢病毒包裝系統(tǒng) |
Lenti-X Packaging Single Shots
第四代包裝系統(tǒng)，高滴度，一步操作 Lenti-X Packaging Single Shots是第四代慢病毒包裝系統(tǒng)，兼具高便捷性和高性能，可保持實驗結(jié)果的一致性；使用便捷，單次反應(yīng)獨立包裝，只需要添加慢病毒表達(dá)載體至預(yù)混試劑中即可；包裝效率高，病毒滴度可高達(dá) 107-108 IFU/ml； 可提供泛嗜性（VSV-G）、單嗜性（ecotropic）和整合酶缺陷 型多種慢病毒包裝系統(tǒng)。  |
| 慢病毒滴度測定 |
Lenti-X p24 Rapid Titer Kit
通過簡便的ELISA方法快速測定滴度 · 通過簡便的ELISA方法快速測定病毒滴度 · 4小時可完成病毒滴度測定 Lenti-X p24 Rapid Titer Kit適用于檢測基于HIV-1慢病毒載體的上清液滴度。該試劑盒可以特異性檢測p24衣殼蛋白質(zhì)，通過與p24標(biāo)準(zhǔn)品制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線相比較，就可以獲得檢測樣品的病毒滴度。  |
Lenti-X GoStix Plus
結(jié)合手機APP使用，10 min定量測定滴度 · 配合使用手機APP，僅需10 min就可定量測定病毒滴度 · 確定收獲病毒的理想時機，確保一致的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率 Lenti-X GoStix plus將慢病毒驗毒棒和一款簡便的手機APP相結(jié)合，通過檢測慢病毒p24蛋白質(zhì)可快速定量測定慢病毒滴度。先使用已知滴度的慢病毒建立IFU/GV ratio，通過樣品測定的GV值（GoStix Value）計算出相應(yīng)的IFU/ml值。  |
| 慢病毒濃縮 |
Lenti-X Concentrator
操作簡便，全程約1 小時，濃縮倍數(shù)10-100倍 · 操作簡單，無需超速離心， · 只需要將慢病毒上清液與濃縮試劑混合孵育后離心即可 · 全程大約1小時，可在較短的時間快速完成病毒純化 · 滴度可提高10-100倍，回收率高達(dá)90%，濃縮效果不受濃縮規(guī)模和病毒滴度的影響  |
| 增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)T細(xì)胞 |
RetroNectin GMP grade
增強慢病毒/逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)，促進增殖 · 可直接購買用于體外臨床應(yīng)用 · 無需MAT，已提交DMF至FDA · 已用于超過68種基因治療臨床試驗方案 美國國立衛(wèi)生研究院Steven Rosenberg博士研究組、紀(jì)念斯隆凱特琳癌癥中心、日本三重大學(xué)醫(yī)院在進行相關(guān)疾病臨床研究過程中，都使用了RetroNectin GMP級試劑進行了T細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)，眾多其它臨床研究使用文章也已發(fā)表。  |
| 慢病毒純化 |
Lenti-X Purification kits
更高的純度和產(chǎn)量，10倍濃縮效果 Lenti-X Maxi Purification Kit可從病毒上清液中純化出高產(chǎn)量、高純度的慢病毒。這種基于重力流的純化系統(tǒng)，操作簡單、快速、高效，且純化效果優(yōu)于基于注射器的純化系統(tǒng)，因為后者會損傷脆弱的病毒顆粒并降低產(chǎn)量。整個操作過程就像純化質(zhì)粒一樣簡單。  |
| 慢病毒整合位點分析 |
Lenti-X Integration Site Analysis Kit
使用基因組步移技術(shù)，確定整合位點 使用Lenti-X Integration Site Analysis Kit檢測重組慢病毒載體整合的確切位點。慢病毒的復(fù)制生命周期會將慢病毒RNA基因組的一個DNA拷貝整合到宿主基因組中。所選擇的整合位點對轉(zhuǎn)基因的表達(dá)和宿主細(xì)胞的表現(xiàn)型都有重要影響。Lenti-X Integration Site Analysis Kit使用基因組步移技術(shù)來識別這些整合位點，以便對其進行測序和分析。  |
| 如此一站式的解決方案，讓你選擇不糾結(jié)，使用更放心。 |
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| Takara Bio作為重要的生物技術(shù)企業(yè)，在病毒基因?qū)胂到y(tǒng)方面造詣頗深、體系完備，擁有慢病毒系統(tǒng)、逆轉(zhuǎn)錄病毒系統(tǒng)、腺相關(guān)病毒系統(tǒng)、腺病毒全套解決方案，為相關(guān)生物學(xué)基礎(chǔ)研究提供強力支持，為寄予厚望的細(xì)胞與基因治療研究護航加碼。 |
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頁面更新：2023-02-16 14:18:05
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