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Takara Taq酶家族再添新成員!

 

PCR及qPCR技術(shù)的核心是利用DNA polymerase對DNA模板進(jìn)行反復(fù)擴增,從而實現(xiàn)對微量的DNA樣本進(jìn)行后續(xù)檢測和分析。PCR技術(shù)不僅僅可用于基礎(chǔ)研究,還適用于臨床診斷、法醫(yī)學(xué)調(diào)查等實際應(yīng)用。這些應(yīng)用要求更穩(wěn)定的性能、卓越的靈敏度和嚴(yán)格的控制標(biāo)準(zhǔn)。因此,所使用的核心原料DNA polymerase必須符合這些要求。
Takara Bio于1988年在日本獲得了使用PCR技術(shù)的基因擴增系統(tǒng)的獨家經(jīng)銷權(quán),1993年在全球范圍內(nèi)獲得PCR相關(guān)專利許可,開始自行生產(chǎn)PCR產(chǎn)品。2004年率先在中國市場銷售qPCR產(chǎn)品,為中國萬千科研人員提供了高質(zhì)量、穩(wěn)定的PCR及qPCR產(chǎn)品及技術(shù)。
 
在此基礎(chǔ)上,Takara Bio從未停止前進(jìn)的腳步,一直根據(jù)客戶的需求不斷研發(fā)新品。
 
 
下表是Takara 經(jīng)典Taq酶及其眾多的衍生PCR 酶成員,組建的Takara Taq酶家族涵蓋了臨床檢測及診斷等多種應(yīng)用場景。
Code No. 產(chǎn)品名稱 特點
R001A TaKaRa Taq 基礎(chǔ)PCR酶,可廣泛用于PCR及qPCR。
R007A TaKaRa Taq™ Hot Start Version
RR001A TaKaRa Ex Taq® 高擴增效率、高靈敏度、高擴增量。推薦用于qPCR。
RR006A TaKaRa Ex Taq® Hot Start Version
RR02MA TaKaRa LA Taq® 長鏈擴增。推薦用于PCR。
RR042A TaKaRa LA Taq® Hot Start Version
RR02AG TaKaRa Ex Taq® with GC Buffer
TCH014
(新品)
Mighty Taq HS DNA Polymerase (High Sensitivity) 抗阻害性強、適用于各種復(fù)雜模板及粗提樣本。
R090A TaKaRa Taq™ HS Low DNA 更低背景的PCR酶
639210 Titanium® Taq DNA Polymerase 缺乏野生型Taq的5→3核酸外切酶活性,靈敏度高,推薦用于PCR
更多產(chǎn)品請瀏覽Takara中國網(wǎng)站:http://grayarearadio.com/
 
  TaKaRa Taq酶優(yōu)勢
1. 真實可靠的活性定義
Taq酶具有靈敏度高、擴增性能強的特點,如果活性定義不準(zhǔn)確或者存在批間差,會導(dǎo)致使用中出現(xiàn)較大的問題。TaKaRa Taq酶活性測定利用同位素法,具有更高的準(zhǔn)確性,是真實的活性定義,可以精準(zhǔn)地控制各個批次之間的活性差異,免除了因不同批次Taq酶酶活不同而導(dǎo)致擴增靈敏度差異帶來的煩惱。 除了真實且精準(zhǔn)的活性測定之外,TaKaRa Taq酶也有功能性驗證數(shù)據(jù),以確保其在PCR應(yīng)用中的性能。有了這兩項檢測的雙重保障,就可以大大減少客戶使用TaKaRa Taq酶在實際應(yīng)用中遇到的問題。
 
2. 別具一格(嚴(yán)格)的污染控制
TaKaRa Taq酶在污染控制方面,除了有常見的核酸酶污染檢測之外,還有別具一格的E.coli基因組DNA的污染檢測,因為目前市售的Taq DNA Polymerase幾乎均是經(jīng)過克隆轉(zhuǎn)化到E.coli中進(jìn)行表達(dá)后,分離提取得到的,那么就可能存在E.coli基因組DNA導(dǎo)致的內(nèi)源性污染,這種污染會明顯影響微生物群相關(guān)研究的結(jié)果,有了這一檢測就能夠進(jìn)一步提高酶的純度以及相關(guān)檢測的準(zhǔn)確度。
下方實驗例通過巢式PCR檢測了TaKaRa Taq酶和其他公司的Taq DNA Polymerase(標(biāo)準(zhǔn)級別)的E.coli基因組DNA污染。
圖1:E. coli基因組的Ori區(qū)域和引物設(shè)計
(Takara Bio Inc.比較結(jié)果)
從圖2結(jié)果來看,TaKaRa Taq中沒有E.coli基因組DNA的擴增片段,但其他公司的Taq DNA Polymerase(標(biāo)準(zhǔn)級別)有ori區(qū)域(143 bp)的擴增片段。證明TaKaRa Taq酶中的E.coli基因組DNA量很少,在巢式PCR擴增檢測界限1-10 fg以下,品質(zhì)高于其他公司標(biāo)準(zhǔn)級別的Taq DNA Polymerase。
 
3. 錦上添花的Takara hot start技術(shù)
Hot Start技術(shù)是提高PCR特異性的重要方法之一,在反應(yīng)液溫度達(dá)到高溫前,抗體一直抑制聚合酶的活性,可有效抑制PCR循環(huán)前因引物的錯配或引物二聚體的形成而導(dǎo)致的非特異性擴增,從而可以提高目的DNA片段的擴增效率,提高PCR反應(yīng)的重現(xiàn)性,且無需追加特殊的反應(yīng)步驟。目前Takara大多數(shù)的PCR酶都有Hot Start Version,在同樣的循環(huán)條件下,可以放心使用Hot Start Version替換以前的酶,基本性能一樣。
 
  TaKaRa Taq酶家族成員重點推薦
新品上市!Mighty Taq——抗阻害熱啟動Taq DNA聚合酶(高靈敏度)
產(chǎn)品特點:
1.抗阻害效果好:對化學(xué)物質(zhì)耐阻害性強;可對應(yīng)多種粗提樣品的擴增,如血液、抗凝血、動物組織、植物組織、土壤等。
2.靈敏度高:可滿足低拷貝模板檢測要求,搭配優(yōu)化的buffer,特異性和靈敏度更高。
3.快速擴增:支持快速反應(yīng)程序,最短可在30 min內(nèi)(儀器快速模式)進(jìn)行Real Time PCR分析,提高檢測效率。
4.兼容性廣:對于模板類型、模板GC含量和引物Tm值等具有廣泛的兼容性,且適合于End Point PCR和qPCR多種檢測場景。
5.操作靈活:本品包含酶和buffer兩種組分,可以根據(jù)樣本的阻害程度,靈活調(diào)整酶量以達(dá)到更好的擴增效果。
 
1)抗阻害性評價-化學(xué)阻害物:
· 針對化學(xué)阻害物質(zhì),選擇具有代表性的腐殖酸、高鐵血紅素、SDS作為雜質(zhì)背景。
· 使用對照品TaKaRa Taq Hot Start Version (R007A)和TCH014,對HL60 cDNA 進(jìn)行hACTB基因擴增。
· 結(jié)果可見,與R007A相比,TCH014具有強大的雜質(zhì)耐受能力,可應(yīng)對含化學(xué)阻害物的樣本的擴增。
 
2)抗阻害性評價-血液:EDTA/檸檬酸鈉/肝素鈉抗凝豬血
· 針對血液樣本的擴增,選擇雜質(zhì)背景較高的3種抗凝豬血(EDTA/檸檬酸鈉/肝素鈉)。
· 使用對照品TaKaRa Taq Hot Start Version (R007A)和TCH014,對血液進(jìn)行COX I基因擴增。(參照RR912體系)
· 結(jié)果顯示,與R007A相比,TCH014具有強大的雜質(zhì)耐受能力,可應(yīng)對血液樣本的擴增。
 
3)抗阻害性評價-動物組織:
· 針對動物組織的擴增,選擇牛肌肉組織、豬肉組織的裂解粗品。
· 使用對照品TaKaRa Taq Hot Start Version (R007A)和TCH014進(jìn)行擴增。(牛肉、豬肉擴增COX I基因,參照RR910/RR912體系)
· 結(jié)果可見,與同類品Taq HS相比,TCH014具有強大的雜質(zhì)耐受能力,可應(yīng)對動物組織裂解粗品的擴增。
 
  Takara低背景Taq Low DNA
由于PCR擴增時的污染可能來源于PCR酶、dNTP、Primer等多個環(huán)節(jié),所以對于診斷公司而言,想要構(gòu)建一套完全沒有污染的檢測體系,需要考慮到上述各個環(huán)節(jié)引入污染的可能。
Takara目前可以根據(jù)客戶需求,定制出Low DNA的PCR檢測體系,包含酶、dNTP、Primer等PCR所必備的試劑,經(jīng)過特殊處理,保證其中基本不含任何來源的DNA污染,從而滿足診斷客戶對高靈敏度、高檢出率并避免假陽性的特殊要求。
上文提到,Takara Taq酶在污染控制方面,有別具一格的E.coli基因組DNA的污染檢測,但如果是在微量檢測樣品的菌群解析及單細(xì)胞的PCR擴增等需要高準(zhǔn)確度解析的實驗體系,出現(xiàn)背景會對結(jié)果分析產(chǎn)生很大影響,這時就需要使用對E.coli基因組DNA污染控制更加嚴(yán)格的Takara低背景Taq Low DNA系列產(chǎn)品。
隨著PCR 酶反應(yīng)性能的提高,宿主大腸桿菌來源DNA 及環(huán)境來源DNA 對PCR 酶非常微弱的污染可導(dǎo)致假陽性及無模板(No Template Control)的擴增。特別是在微量檢測樣品的菌群解析及單細(xì)胞的PCR 擴增等需要高準(zhǔn)確度解析的實驗體系,如果出現(xiàn)背景會對結(jié)果分析產(chǎn)生很大的影響。
為了滿足「高純度、高靈敏度的PCR酶」這一需求開發(fā)了Low DNA系列產(chǎn)品。
Takara Bio向中國用戶持續(xù)穩(wěn)定供給以PCR及qPCR技術(shù)為核心的上下游產(chǎn)品,產(chǎn)品主要包括PCR/qPCR、基因克隆、基因功能研究、蛋白質(zhì)功能研究、二代測序、干細(xì)胞研究等產(chǎn)品及服務(wù),并可提供客戶定制化服務(wù)。還開展以細(xì)胞治療為中心的生物工程領(lǐng)域的技術(shù)開發(fā)與服務(wù),銷售細(xì)胞治療和基因治療相關(guān)產(chǎn)品。
 
更多需求,請發(fā)送郵件至:bulkorder@takarabiomed.com.cn
 
本文的關(guān)聯(lián)產(chǎn)品:
Code No. 產(chǎn)品名稱 特點
TCH004 PrimeScript™ III Reverse Transcriptase 耐熱型反轉(zhuǎn)錄酶(~55℃)
適用于RT-LAMP
2641A Reverse Transcriptase M-MLV (RNase H-) 基礎(chǔ)反轉(zhuǎn)錄酶
2680A PrimeScript™ Reverse Transcriptase 高性能反轉(zhuǎn)錄酶
2313A Recombinant RNase Inhibitor 重組型RNA酶抑制劑
4030 dNTP Mixture DNA聚合酶底物
RR380A BcaBEST® DNA Polymerase ver.2.0 LAMP等溫擴增聚合酶
R510A TaKaRa Tth 多功能PCR酶(一酶兩用)
2820 Uracil DNA Glycosylase (UNG),heat-labile 消化含有dU的單鏈或雙鏈DNA
TCH002 Lyo-Ready qPCR Master Mix 可凍干的探針法qPCR試劑(含凍干保護劑)
TCH003 Lyo-Ready One Step RT-qPCR Master Mix 可凍干的探針法1步法RT-qPCR專用試劑(含凍干保護劑)
 
 

頁面更新:2024-04-29 11:35:03