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■ 制品內(nèi)容 (Code No.: RR042A) |
TaKaRa LA Taq HS |
125 U |
10X LA PCR Buffer II (Mg2+ Plus)(25 mM) |
1 ml |
dNTP Mixture (各2.5 mM) |
400 μl |
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■ 制品說明 |
本制品是抗Taq 單克隆抗體和TaKaRa LA Taq 的混合制品,適用于Hot Start PCR。高溫加熱前抗Taq 單克隆抗體與LA Taq 酶結(jié)合,抑制聚合酶活性,可以抑制低溫條件下由引物的非特異性退火或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增???em>Taq 單克隆抗體在PCR反應(yīng)最初的DNA變性步驟中變性,無需特殊失活處理,可以在常規(guī)PCR條件下使用。 |
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預(yù)變性說明如下:
※ 當(dāng)對(duì)長片段或富含GC序列等復(fù)雜的模板進(jìn)行擴(kuò)增時(shí),如有必要,可進(jìn)行94℃ 1 min的預(yù)變性處理 (過度熱處理可能會(huì)導(dǎo)致PCR酶失活)。 |
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■ 保存 |
-20℃。 |
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■ 活性定義 |
用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物,在74℃、30分鐘內(nèi),攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個(gè)活性單位 (U)。 |
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■ 純度 |
50 U的本酶和1 μg的λ-Hind III、1 μg的Supercoiled pBR322 DNA或1 μg的λDNA在74℃下反應(yīng)1小時(shí),均未檢出內(nèi)切酶和外切酶活性。 |
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■ 用途 |
Hot Start PCR法擴(kuò)增DNA片段,適用于15 kb以上DNA片段的
擴(kuò)增。
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■ PCR產(chǎn)物 |
使用本制品擴(kuò)增得到的大部分PCR產(chǎn)物3’端附有一個(gè)“A” 堿基,因此可直接克隆于T-Vector中。但克隆片段過長 (大于5 kb),TA克隆效率將會(huì)降低。也可以將PCR產(chǎn)物進(jìn)行末端平滑化和磷酸化后克隆到平滑末端載體中。 |
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