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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

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長片段擴增試劑盒TaKaRa LA PCR™ Kit Ver.2.1
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價格（元） 說明書 數(shù)量
Takara RR013A TaKaRa LA PCR™ Kit Ver.2.1 50 Rxns ￥825
Takara RR013B (A × 2) TaKaRa LA PCR™ Kit Ver.2.1 50 Rxns × 2 ￥1,485
 
■ 制品內(nèi)容 (Code No.: RR013A : 50 次量)
TaKaRa LA Taq (5 U/ μl) 125 U
dNTP Mixture (各2.5 mM) 400 μl
10 × LA PCR Buffer II (Mg2+ plus; Mg2+濃度25 mM) 250 μl
10 × LA PCR Buffer II (Mg2+ free) 250 μl
MgCl2 (25 mM) 500 μl
Control Template (100 ng/μl)*1 10 μl
Control Primer LA3 (10 μM) 10 μl
Control Primer LA4 (10 μM) 10 μl
λ -Hind III digested MW Marker*2 (100 ng/μl) 20 μl
2 × GC Buffer I (Mg2+ plus; Mg2+ 濃度5 mM)*3 1.25 ml
2 × GC Buffer II (Mg2+ plus; Mg2+ 濃度5 mM)*3 1.25 ml
Control Primer GC1 (10 μM) 10 μl
Control Primer GC2 (10 μM) 10 μl
   
*1 Control Template
Human HL60來源的基因組DNA，濃度為100 ng/μl。
*2 λ-Hind III digest MW Marker
Marker大小范圍：23,130；9,416；6,557；4,361；2,322；2,027；564；125 bp。
*3 GC Buffer的使用
當擴增GC rich或復(fù)雜的立體結(jié)構(gòu)DNA片段時，請先使用GC Buffer I，當使用GC Buffer I 不能擴增時，再試用GC Buffer II。
 
 
■ 制品說明
本試劑盒應(yīng)用了特別的LA PCR (Long and Accurate PCR) 技術(shù)，適用于正確地擴增長鏈DNA片段。使用TaKaRa LA Taq并搭配專用的反應(yīng)緩沖液 (10 × LA PCR Buffer II)，可得到更長更準確的擴增產(chǎn)物。以λ DNA為模板，擴增產(chǎn)物可達48 kb；以基因組DNA為模板，擴增產(chǎn)物可達30 kb。
本試劑盒包含所有適合LA PCR反應(yīng)的必要試劑，以達到高效擴增、準確地獲得長鏈PCR產(chǎn)物。LA PCR技術(shù)擴大了PCR技術(shù)的應(yīng)用范圍，并在推動基因組分析的方方面面體現(xiàn)著特殊價值。本試劑盒同樣適用于短鏈目的產(chǎn)物的擴增。此外，本制品中還配備了高GC含量模板專用的Buffer (2×GC Buffer I、II)。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ Control Primer序列
引物名稱 各引物序列
Control Primer LA3*1
    5′-ACATGATTAGCAAAAGGGCCTAGCTTGGACTCAGA-3′
Control Primer LA4*1
    5′-TGCACCTGCTCTGTGATTATGACTATCCCACAGTC-3′
Control Primer GC1*2
    5′-GGGAGGGGACCGGGGAACAGAG-3′
Control Primer GC2*2
   5′-GAACAGTCCGTCACTTCACGTG-3′
*1 Control Primer LA3和Control Primer LA4可以擴增Control Template的17.5 kb 片段。
*2 Control Primer GC1和Control Primer GC2可以擴增Control Template的1,255 bp的GC rich區(qū)域。
 
■ 使用注意
1. 試劑盒中的所有組份，在室溫～37℃完全融化后，用移液槍吸打混勻或?qū)icrotube上下顛倒混勻，盡量避免劇烈振蕩?；旌?0×LA PCR Buffer, TaKaRa LA Taq時, 為防止起泡或酶失活，需注意仔細輕輕混合。融化后的各組份在使用前請置于冰中保存。
2. 配制反應(yīng)液時，使用移液器輕輕吸打混合，不能劇烈振蕩。
3. 擴增長片段DNA時的引物特異性要高。引物的推薦長度為25-30 mers。
4. 盡量使用高純度的模板DNA。擴增長片段DNA時的模板使用量為通常PCR時的4～5倍。
 
 

頁面更新：2023-11-01 16:20:53

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