本制品是2 Step Real Time RT-PCR用的理想反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)試劑。5×PrimeScript RT Master Mix中含有定量RT-PCR的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)所需的所有試劑 (PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反應(yīng)Buffer),加入模板RNA和水即可迅速進(jìn)行反應(yīng)。使用具有較強(qiáng)延伸能力的PrimeScript RTase,與制品PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)(Code No.: RR037Q/A/B) 相同,可以在較短時間內(nèi)高效合成Real Time PCR用模板cDNA。
本制品合成的cDNA可以用于嵌合法和探針法qPCR分析,可以根據(jù)實驗?zāi)康呐cTB Green® Premix Ex Taq™ II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)* 、TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B)* 和Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 等定量試劑配合使用,能夠進(jìn)行高性能的基因表達(dá)分析。 |
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)產(chǎn)品的名稱從2017年12月下旬開始,將逐步變更為「TB Green系列」。產(chǎn)品Code、性能和原有產(chǎn)品相比沒有變化,請繼續(xù)放心使用。
產(chǎn)品名稱將隨新lot的產(chǎn)品逐步變更,產(chǎn)品網(wǎng)頁或操作說明書可能會先于產(chǎn)品標(biāo)簽變更,望知悉! |
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■ 保存 |
-20℃。
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■ 試劑盒特長 |
1. 制品為預(yù)先混好的Premix形式,只需加入模板RNA和水便可以開始反應(yīng)。
2. 可以在較短時間內(nèi)高效合成Real Time PCR用cDNA,是進(jìn)行2 Step Real Time RT-PCR反應(yīng)的理想試劑。
3. 使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2種反轉(zhuǎn)錄引物,可以合成適合Real Time PCR用cDNA。
4. Real-time RT PCR定量需要建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的條件就是需要將總RNA和反轉(zhuǎn)錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時,由于模板濃度低不穩(wěn)定,因而會縮小曲線范圍,結(jié)果準(zhǔn)確度降低。本制品中附加了標(biāo)準(zhǔn)曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR),將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時也能夠進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋,容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 |
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■ 注意事項 |
1. 5X PrimeScript RT Master Mix在使用前要小心地離心收集到反應(yīng)管底部。由于5X PrimeScript RT Master Mix粘度高,用移液槍慢慢反復(fù)吸打充分混勻后使用。
2. 分裝試劑時務(wù)必使用新的槍頭 (Tip),以防止樣品間污染。
3. 本制品中已經(jīng)加入了反轉(zhuǎn)錄Primer(Oligo dT Primer 和Random 6 mers),如果要使用Gene Specific Primer進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),則不能使用本制品。 |
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Technote: |
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