本制品是采用TB Green嵌合熒光法進行Real Time PCR的專用試劑。制品中含有Real Time PCR反應(yīng)的合適濃度TB Green,是一種2X 濃度的Premix Type試劑,進行實驗時,PCR反應(yīng)液的配制十分方便簡單。制品中使用了抗Taq抗體的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq® HS,與Real Time PCR用最適Buffer組合,可以有效抑制非特異性的PCR擴增,大大提高PCR的擴增效率,可以進行高靈敏度的Real Time PCR擴增反應(yīng)。
另外,本制品中添加了Tli RNaseH (耐熱性RNaseH),以cDNA作為模板進行PCR反應(yīng)時,可以很好地抑制由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應(yīng)造成的阻害作用。
本制品適合于快速Real Time PCR擴增反應(yīng),可以在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標準曲線,對靶基因進行準確定量、檢測,重復(fù)性好,可信度高。 |
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■ 保存 |
4℃可保存6個月。
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避光保存,避免污染。 |
長期保存請置于-20℃。產(chǎn)品融解后請于4℃保存,并在6個月內(nèi)用完。 |
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■ 注意事項 |
1. 使用前,請上下輕輕顛倒混勻,避免產(chǎn)生氣泡,防止因混合不均勻造成的反應(yīng)效果不佳。
(1)
請勿渦旋振蕩混勻。
(2) TB Green Premix Ex Taq (2X conc.) (Tli RNaseH Plus),Bulk在-20℃存放可能會產(chǎn)生白色或淡黃色的沉淀,可用手握緩慢溶解,于室溫短時間避光放置,輕柔上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀會導(dǎo)致溶液成分不均勻,使用前務(wù)必充分混勻試劑。
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2. 配制反應(yīng)液時,試劑請于冰上放置。
3. 本制品中含有熒光染料TB Green,配制PCR反應(yīng)液時應(yīng)避免強光照射。
4. 反應(yīng)液的配制、分裝請一定使用新的 (無污染的) 槍頭、Microtube等,盡量避免污染。
5. 本制品中使用的TaKaRa Ex Taq HS是利用抗Taq抗體的Hot Start用DNA聚合酶,與其他公司的化學(xué)修飾型Hot Start用DNA聚合酶相比,不需要PCR反應(yīng)前的95℃、5~15分鐘的酶的活性化反應(yīng)。如果高溫處理時間過長,會使酶的活性下降,其PCR的擴增效率、定量準確度等都會受到影響。如果在PCR反應(yīng)前進行模板的預(yù)變性,通常設(shè)定為95℃、30秒。 |
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