本制品是采用TB Green嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專用試劑。制品中含有Real Time PCR反應(yīng)的最適濃度TB Green,是一種2X 濃度的Premix Type試劑,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),PCR反應(yīng)液的配制十分方便簡單。
本制品通過添加輔助蛋白質(zhì)和對Buffer組份的改良,使反應(yīng)特異性比TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B) 更高。特別對影響嵌合法的主要因素的引物二聚體的產(chǎn)生有明顯抑制作用。本制品建議使用3 Step PCR作為標(biāo)準(zhǔn)流程,3 Step PCR反應(yīng)時(shí)間稍長,但能有效抑制非特異性的PCR擴(kuò)增。
本制品對微量模板濃度也有很高的靈敏度,可以在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,對靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量檢測,重復(fù)性好,可信度高。
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■ 保存 |
4℃保存6個(gè)月。
避光保存,避免污染。
長期保存請置于-80℃,勿存于-20℃。產(chǎn)品融解后請于4℃保存并在6個(gè)月內(nèi)用完。
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■ 試劑盒特長 |
1. 適用于Real Time PCR反應(yīng),可以快速、準(zhǔn)確地對目的基因進(jìn)行檢測、定量。
2. 在2X 濃度的Premix中,預(yù)先混有TB Green,PCR反應(yīng)液配制時(shí),只需加入模板、引物、滅菌水便可進(jìn)行Real Time PCR反應(yīng),操作簡單方便。
3. DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS,可以進(jìn)行Hot Start法PCR反應(yīng),有效防止熱循環(huán)反應(yīng)前由引物非特異性退火引起的非特異性擴(kuò)增。同時(shí)制品中還添加了輔助蛋白,可以進(jìn)一步抑制PCR反應(yīng)中由于引物的非特異性退火或引物二聚體等引起的非特異性擴(kuò)增。
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■ 使用注意 |
1. 使用時(shí)請上下顛倒輕輕均勻混合,避免產(chǎn)生氣泡,防止因混合不均勻造成的反應(yīng)不足。
a) 請勿渦旋振蕩混勻。
b) TB Green Premix DimerEraser (2X conc.) 在-80℃存放可能會(huì)產(chǎn)生白色或淡黃色的沉淀,可用手掌溫度緩慢溶解于室溫避光放置,輕柔的上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。
c) 沉淀會(huì)導(dǎo)致溶液成分不均一,使用前務(wù)必充分混勻試劑。
2. 請于冰上配制反應(yīng)試劑。
3. 本制品中含有熒光染料TB Green,保存制品或配制PCR反應(yīng)液時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光照射。
4. 反應(yīng)液的配制、分裝請一定使用新的 (無污染的) 槍頭、Microtube等,盡量避免污染。
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