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■ 制品內(nèi)容 (25 次量) |
本試劑盒分試劑Set與Column Set兩部分。 |
試劑Set |
RNase A(10 mg/ml) |
1.1 ml × 2 |
Buffer P1 |
220 ml |
Buffer P2*1 |
220 ml |
Buffer P3*2 |
220 ml |
Buffer PB |
420 ml |
Buffer PW1 |
960 ml |
Buffer PW2 |
850 ml |
Buffer PE |
140 ml |
Endo-free H2O for 70% EtOH*3 |
30 ml |
Endo-free H2O |
30 ml |
Endo-free TE |
30 ml |
*1 含有強堿溶液,應(yīng)避免與皮膚、衣物等接觸。若不小心接觸到眼睛或皮膚時,請立即到醫(yī)院進行處理。
*2 含有強變性劑,應(yīng)避免與皮膚、衣物等接觸。若不小心接觸到眼睛或皮膚時,請立即到醫(yī)院進行處理。
*3 首次使用前,向Endo-free H2O for 70% EtOH中添加70 ml的100%乙醇。
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Column Set |
MidiEF DNA Column(包含預(yù)裝的Column Filter) |
25 支 |
Plastic Washer* |
10 枚 |
* Plastic Washer請重復(fù)使用。
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【試劑盒之外所需準(zhǔn)備試劑】 |
·無水乙醇 |
·異丙醇 |
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■ 制品說明 |
本試劑盒是用于從培養(yǎng)細(xì)菌中提取各種無內(nèi)毒素質(zhì)粒(plasmid、cosmid)的中量純化試劑盒。試劑盒采用了傳統(tǒng)的SDS堿裂解法,結(jié)合陰離子交換樹脂和特殊的buffer組合,可以有效去除內(nèi)毒素,具有高效、快速、方便之特點。使用本試劑盒可從100 ml LB培養(yǎng)基過夜培養(yǎng)菌液中純化得到200 μg的高純度無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA(OD260/OD280=1.8~2.0,內(nèi)毒素含量<0.1 EU/μg)。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA溶解于Endotoxin-free TE或Endotoxin-free H2O中,純度高,可直接用于轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染、限制酶切等分子生物學(xué)實驗。 |
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■ 保存與運輸 |
1. 本試劑盒可以在室溫下(15-25℃)保存,但溫度較低時,有的Buffer會出現(xiàn)沉淀,使用前需37℃加熱直至沉淀消失。
2. Buffer P1中加入RNase A后可于4℃保存6個月
3. RNase A可于室溫下(15-25℃)保存6個月,長期保存需存放于-20℃。
4. 本試劑盒于室溫下(15-25℃)運輸。
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■ 使用注意 |
1. 初次使用本試劑盒時,請將RNase A混濁液全部加入到Buffer P1中,均勻混合后4℃保存,可穩(wěn)定保存6個月。若6個月內(nèi)不能全部使用完,建議不要全部混合,可依每次需要用量按照Buffer P1:RNase A(10 mg/ml)= 100:1的比例單獨混合使用。
2. 首次使用前,向Endo-free H2O for 70% EtOH中添加70 ml的100%乙醇。
3. 檢查Buffer P2和Buffer P3中是否有沉淀,如果有沉淀請將試劑置于37℃溫浴直至沉淀全部消失,不可劇烈振蕩Buffer P2,以免產(chǎn)生大量氣泡。
4. Buffer P2使用后,應(yīng)立即蓋緊蓋子,避免試劑長時間與空氣接觸。
5. Buffer P3使用前請于4℃預(yù)冷。
6. 試劑中含有強堿及變性劑,操作時應(yīng)佩戴手套等防護用具。
7. 提取過程中所使用的離心管、移液管、吸頭須無熱原或無內(nèi)毒素,玻璃器皿須經(jīng)180℃過夜處理。
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