| 人iPS細胞培養(yǎng) | |||||||||
| 人誘導多能干細胞（induced pluripotent stem cells，iPSCs) 由體細胞去分化重編程獲得，具備與胚胎干細胞（Embryonic stem cell，ESCs）相似的多向分化潛能和自我更新能力，同時可完全保留供體（疾病、健康）的遺傳背景。iPS細胞避開了胚胎干細胞可能面臨的倫理道德方面的“牽絆”，加上有諾貝爾生理學或醫(yī)學獎光環(huán)的“加持”，深受科研和醫(yī)療領域研究者的“青睞”。人iPS細胞結(jié)合基因編輯技術，可以制備出各種各樣組織類型的、具有患者特異性或疾病特異性的人體細胞，作為體外細胞模型應用于疾病發(fā)病機制研究和藥物研發(fā)篩選等工作，即“iPS derived disease model in a dish”。
傳統(tǒng)的人iPS細胞（和人ESCs）培養(yǎng)呈現(xiàn)集落狀生長，需要操作人員具備一定的實驗技巧和熟練程度，特別是在傳代培養(yǎng)時，如果分離接種的集落太大，容易出現(xiàn)分化，集落太小，又容易出現(xiàn)死亡。而且在基因編輯等操作后，為了分離和篩選感興趣的基因型，單細胞必須被分離并擴增為克隆細胞系，但是對于集落狀生長的iPS細胞，一旦涉及單細胞相關的分離和操作，其細胞活力和多能性都面臨巨大挑戰(zhàn)。 Takara提供新型的DEF-CS培養(yǎng)系統(tǒng)（Y30010），支持人iPS細胞（和人ESCs）在無血清、無飼養(yǎng)層條件下培養(yǎng)，可以實現(xiàn)穩(wěn)健增殖并維持良好的干細胞多能性。區(qū)別于傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法，All-In-One型的DEF-CS系統(tǒng)支持新型的非集落狀生長，可以輕松進行單細胞傳代，干細胞培養(yǎng)小白也可以很快上手，更重要的是DEF-CS培養(yǎng)系統(tǒng)可以有效支持單個iPS細胞的存活和擴增，規(guī)避了集落狀培養(yǎng)帶來的挑戰(zhàn)和困難(Asplund et al. 2016)。 |
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| Takara提供適合于更多應用場景的DEF-CS培養(yǎng)系統(tǒng)，包括無異源物質(zhì)（Xeno-free）級別版本（Y30045）、GMP培養(yǎng)版本（Y30071），可以支持人iPS細胞從基礎培養(yǎng)階段向工業(yè)化開發(fā)和臨床應用階段過渡。 | |||||||||
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| 人iPS細胞培養(yǎng)相關學習資料如下，不斷更新中，歡迎隨時查看或下載！ | |||||||||
| 1. 技術資料（Technical notes） | |||||||||
| · Using the DEF-CS system to culture human iPS cells 說明：新型的人iPS細胞生長模式，單層非集落、高度同質(zhì)化。 |
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| · Direct comparison of the Cellartis DEF-CS system with different vendors' systems for culturing human pluripotent stem cells 說明：幾大培養(yǎng)系統(tǒng)性能比對，Takara DEF-CS系統(tǒng)優(yōu)勢明顯。 |
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| · Single-cell cloning of hiPS cells 說明：攻克難關，Takara DEF-CS系統(tǒng)應用于iPS細胞單克隆構建。 |
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| · Reprogramming of human PBMCs using Sendai virus and the Cellartis DEF-CS 500 Culture System 說明：高成功率，Takara DEF-CS系統(tǒng)應用于外周血單核細胞（PBMCs）重編程。 |
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| · Reprogramming of human fibroblasts using Sendai virus and the Cellartis DEF-CS 500 Culture System 說明：高成功率，Takara DEF-CS系統(tǒng)應用于成纖維細胞重編程。 |
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| · Gene editing in hiPS cells by using electroporation or gesicle technology 說明：完整解決方案，Takara DEF-CS系統(tǒng)應用于iPS細胞基因編輯。 |
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| 2. 實驗方案（Protocols） | |||||||||
| · Cellartis DEF-CS Culture System User Manual 說明：詳細使用手冊，教你使用Takara DEF-CS系統(tǒng)進行人iPS細胞培養(yǎng)（復蘇、換液、傳代、凍存）。 |
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| · Transferring iPSCs from other feeder-free culture systems to the DEF-CS culture system 說明：內(nèi)含小技巧，來自其他無飼養(yǎng)層法培養(yǎng)的iPS細胞也可以成功適應新型的Takara DEF-CS系統(tǒng)。 |
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| · Transferring iPSCs on MEFs to the DEF-CS culture system 說明：內(nèi)含小技巧，來自飼養(yǎng)層法培養(yǎng)的iPS細胞也可以成功適應新型的Takara DEF-CS系統(tǒng)。 |
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| · Confirmation of pluripotency by spin embryoid body formation 說明：教你一招，利用擬胚體法鑒定干細胞多能性。 |
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| · Reprogramming fibroblasts using the Cellartis DEF-CS 500 Culture System 說明：步驟詳解，利用仙臺病毒重編程成纖維細胞。 |
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| · Reprogramming peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) using the Cellartis DEF-CS 500 Culture System 說明：步驟詳解，利用仙臺病毒重編程外周血單核細胞（PBMCs）。 |
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| · Video protocol: Culturing & editing human iPSCs with CRISPR/Cas9 and single-cell cloning 說明：視頻演示，看看Takara如何進行人iPS細胞培養(yǎng)和（電穿孔法）基因編輯實驗。 |
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| 3. 講座音頻（Webinars） | |||||||||
| · Edited hiPS cell lines for disease modeling 說明：主講人Montse Morell博士，人iPS細胞創(chuàng)建疾病模型的挑戰(zhàn)及解決方案。 |
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| 4. 常見問答（FAQs） | |||||||||
| · Cellartis DEF-CS 500 Culture System FAQs 說明：Takara DEF-CS培養(yǎng)系統(tǒng)答疑時間，產(chǎn)品相關6個+操作相關6個。 |
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| 5. 文獻案例（Citations） | |||||||||
| · Cellartis DEF-CS 500 Culture System citation list 說明：Takara DEF-CS培養(yǎng)系統(tǒng)發(fā)表文獻集合，涉及基礎、轉(zhuǎn)化、臨床前、生物醫(yī)藥等研究領域。 |
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| 6. 學術海報（Posters） | |||||||||
| · Footprint-free gene editing using CRISPR/Cas9 and single-cell cloning of edited human iPS cells 說明：完整工作流程，低脫靶效應的人iPS細胞基因編輯和編輯后單細胞克隆培養(yǎng)。 |
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| 延伸閱讀： | |||||||||
| 1. 單個干細胞基因操作實驗的理想選擇 2. 科研版“PPAP”：iPSC基因編輯 3. #圍觀# 平平無奇的“人iPS細胞-疾病模型”制備小天才！ 4. 人iPS細胞基因編輯解決方案 5. 人iPS細胞應用于疾病模型研究解決方案 |
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頁面更新：2024-12-02 13:39:43
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