欧美成 人版在线_久久免视看国产_亚洲成l人在线观看线路_久久96热在精品国产网站

我們使用cookie改善您的瀏覽體驗(yàn)并提供有意義的內(nèi)容。請閱讀我們的cookie協(xié)議
收藏我們 在線訂購 CoA查詢
     

機(jī)構(gòu)用戶解決方案

產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

當(dāng)前位置：首頁> 產(chǎn)品選擇指南 > cDNA合成 & 克隆 > DNA Ligation > DNA連接試劑盒DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
DNA連接試劑盒DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價(jià)格（元） 說明書 數(shù)量
Takara 6023Q DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ 1 Kit ￥155
Takara 6023 DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ 1 Kit ￥516
無標(biāo)題文檔
 
 
RNA起始合成cDNA → PCR擴(kuò)增目的片段 → PCR產(chǎn)物純化 → In-Fusion無縫克隆 → 轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
 
TA克隆
基因組DNA  
粘性末端連接
 
 
■ 制品內(nèi)容 (Code No.: 6023)
Ligation Mix 150 μl × 5
按每次反應(yīng)使用7.5 μl 進(jìn)行計(jì)算，可使用100次。
 
■ 制品說明
DNA片段連接反應(yīng)頻繁用于基因工程實(shí)驗(yàn)操作中。DNA的連接通常使用T4 DNA Ligase，但DNA片段的末端形狀對T4 DNA Ligase連接反應(yīng)速度影響很大。因此，根據(jù)DNA片段末端形狀需要調(diào)整酶的添加量和反應(yīng)時(shí)間。本公司研發(fā)的DNA Ligation Kit，不需要調(diào)整酶添加量和反應(yīng)時(shí)間，可簡便、快速地進(jìn)行DNA連接反應(yīng)。
DNA Ligation Kit〈Mighty Mix〉是以往DNA Ligation Kit 的升級產(chǎn)品，連接效率高。本制品具有以下特點(diǎn)：
1) 預(yù)混型
是酶和Buffer的預(yù)混型試劑，只需在DNA中加入Ligation Mix溶液即可高效完成連接反應(yīng)，操作簡便。本制品反復(fù)凍融后，反應(yīng)性能仍然穩(wěn)定。
2) 也適用于平滑末端和TA克隆
不僅適用于粘性末端連接，也可以高效地進(jìn)行平滑末端的DNA連接和TA克隆。
3) 連接反應(yīng)僅需5分鐘
25℃反應(yīng)5分鐘即可完成插入片段與質(zhì)粒載體的連接，節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
 
DNA Ligation Kit的反應(yīng)液量和反應(yīng)條件
克隆編號 DNA溶液：Ligation Mix (體積比) 反應(yīng)條件
[1] 質(zhì)粒載體中插入外源DNA片段
[標(biāo)準(zhǔn)操作流程]
[快速操作流程]		 1：1
 
16℃，30分鐘
25℃，5分鐘
[2] PCR產(chǎn)物的T載體克隆 1：1 16℃，30分鐘
[3] 線性DNA的分子內(nèi)連接 (自身環(huán)化) 1：1 16℃，30分鐘
[4] Linker Ligation，Adaptor Ligation質(zhì)粒載體中插入linker DNA cDNA與連頭 (Linker、 Adaptor) 連接
 
1：1
1：2
16℃，30分鐘
[5] λ噬菌體中插入外源DNA片段(體外包裝) 1：2 26℃，10分鐘
* 說明書提供的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是表中使用DNA Ligation Kit獲得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，僅供參考。
 
■ 保存
-20℃。使用前在冰上融化 (5-10分鐘)，吸打混勻。已證實(shí)反復(fù)凍融50次對反應(yīng)性能沒有影響。
 
■ DNA Ligation Kit的操作原理圖
 
 
■ 使用注意
1. DNA Ligation是-20℃保存的冷凍品，反復(fù)凍融不會(huì)失活。使用前在冰上融化，吸打混合。
2. 使用本試劑盒獲得的DNA連接反應(yīng)液，可直接用于瓊脂糖凝膠電泳。如果進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳時(shí)，建議乙醇沉淀后再進(jìn)行電泳。
3. DNA連接反應(yīng)液直接進(jìn)行苯酚抽提時(shí)，反應(yīng)液會(huì)出現(xiàn)白色渾濁。
4. DNA連接反應(yīng)后進(jìn)行乙醇沉淀處理時(shí)，向反應(yīng)液中加入1/10體積的3 M CH3COONa (pH5.2) 或1/20體積的5 M NaCl和2-2.5倍體積的無水乙醇，-20℃靜置20分鐘或-80℃靜置10分鐘后，4℃離心回收DNA。DNA含量較少時(shí)，加入Carrier使沉淀效果更好。
 
 

頁面更新：2023-12-01 15:11:15

瀏覽此產(chǎn)品的客戶還對以下信息感興趣