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■ 制品內(nèi)容 (20 μl 反應(yīng)×50次量) |
5×PrimeScript IV cDNA Synthesis Mix*1 |
200 μl |
Random 6 mers (50 μM)*2 |
100 μl |
RNase Free H2O |
1 ml × 2 |
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*1:含有PrimeScript IV RTase、RNase Inhibitor、Oligo dT Primer、dNTP Mixture及反應(yīng)Buffer
(含Mg+2)。
*2:不含polyA的 RNA起始cDNA的合成及Real Time PCR用的cDNA的合成,RNA全部區(qū)域cDNA的
均勻合成等情況下添加至反應(yīng)液中。 |
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■ 制品說(shuō)明 |
PrimeScript IV 1st strand cDNA Synthesis Mix是從total RNA或polyA+ RNA起始合成1st strand cDNA的試劑盒。合成1st strand cDNA所需的反轉(zhuǎn)錄酶PrimeScript IV RTase、RNase Inhibitor、 Oligo dT Primer、dNTP Mixture及反應(yīng)Buffer已預(yù)混成premix型試劑,反應(yīng)時(shí),只需要添加模板RNA及水即可簡(jiǎn)單快速開(kāi)始反應(yīng)。
本制品通過(guò)添加輔助蛋白質(zhì)改良了Buffer的組成,省去了以往進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)前的RNA變性操作。此外,PrimeScript IV RTase相比于以往制品,能在更短時(shí)間內(nèi)合成cDNA。
通過(guò)提高耐熱性使反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)可以在高溫下進(jìn)行,在使用Gene Specific Primer合成cDNA的效率和特異性的提升上發(fā)揮了重要作用。
本制品合成的1st strand cDNA適用于2nd strand cDNA合成、雜交、PCR法擴(kuò)增,全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)的制備等需要高品質(zhì)全長(zhǎng)cDNA的應(yīng)用。另外,通過(guò)試劑盒中附帶的Random 6 mers,可以從不含有polyA+ 的RNA起始合成cDNA,同時(shí)也適用于利用Real Time PCR方法進(jìn)行基因表達(dá)分析的cDNA合成。 |
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