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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

當(dāng)前位置：首頁> 產(chǎn)品選擇指南 > cDNA合成 & 克隆 > 修飾酶/DNA & RNA Polymerase > DNA聚合酶T4 DNA Polymerase
DNA聚合酶T4 DNA Polymerase
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價(jià)格（元） 說明書 數(shù)量
Takara 2040A T4 DNA Polymerase 100 U ￥269
Takara 2040B (A × 5) T4 DNA Polymerase 100 U × 5 ￥1,207
無標(biāo)題文檔
 
■ 制品內(nèi)容
T4 DNA Polymerase (5 U/μl) 100 U
10X T4 DNA Polymerase Buffer 1 ml
0.1% BSA* 1 ml
   
* BSA在-20℃下易產(chǎn)生沉淀，應(yīng)盡量避免多次反復(fù)凍融。短期使用請(qǐng)?jiān)?℃下保存。產(chǎn)生稍許沉淀不影響反應(yīng)效果。
 
■ 制品說明
在模板及引物存在的條件下，催化與模板互補(bǔ)的脫氧核苷酸依次選擇性地連接在引物的3′-OH末端上的反應(yīng)。本酶還具有單鏈DNA特異性的3′→5′外切核酸酶活性，該活性比Klenow Fragment強(qiáng)100～1,000倍。本酶沒有5′→3′的外切核酸酶活性。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid containing phage T4 DNA polymerase gene
 
■ 活性定義
以活性化Poly (dA-dT) DNA為摸板/引物，在37℃、pH8.8條件下，30分鐘內(nèi)使10 nmol的dATP和dTTP摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定義為1個(gè)活性單位 (U)。
 
■ 用途
1. 利用較強(qiáng)的3′→5′的外切核酸酶活性，通過置換合成從DNA片段的3’末端進(jìn)行標(biāo)記。
2. DNA末端的平滑化。
3. 通過引物延伸法解析mRNA轉(zhuǎn)錄的起始點(diǎn)。
 
■ 使用注意
1. 本酶的最適pH為8-9，在pH7.5及pH9.7時(shí)活性降低50%。
2. 活性的表達(dá)需要Mg2+的存在。為了獲得較大活性，還需要SH基的還原劑存在。
3. 整個(gè)反應(yīng)體系中的離子強(qiáng)度超過100 mM時(shí)活性將被抑制。
4. 本酶易受模板DNA高級(jí)結(jié)構(gòu)的影響，T4 gene 32產(chǎn)物可以顯著提高聚合酶活性，而3′→5′的外切核酸酶活性則完全被抑制。
 
 

頁面更新：2023-12-01 16:39:02

使用文獻(xiàn)

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