■ 制品內(nèi)容 (Code No.: 2313A) | ||
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■ 制品說明 | ||
本制品是通過親和色譜等方法從大腸桿菌中純化的豬肝RNA酶抑制劑得到的重組體。該酶的特征與豬肝和人胎盤來源的此類酶相似,與RNase A形成1:1復(fù)合體,抑制RNase活性。該反應(yīng)是可逆的,通過尿素及巰基類試劑能夠解離復(fù)合體,使RNase復(fù)活而抑制劑不可逆失活。使用時可直接加入含有RNA的反應(yīng)液中。本品屬蛋白質(zhì)性質(zhì),與其它競爭性抑制劑 (核酸類、無機磷酸類) 不同,可以很容易地通過苯酚處理將其從反應(yīng)體系中除去。但不能抑制反轉(zhuǎn)錄酶的RNase H的活性。本品具有與豬肝和人胎盤來源的酶相同的應(yīng)用。 | ||
■ 保存 | ||
-20℃。 | ||
■ 起源 | ||
E. coli containing a plasmid that carries the porcine liver RNase Inhibitor gene. | ||
■ 活性定義 | ||
抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定義為1個活性單位 (U)。(抑制活性通過抑制RNase A水解Cyclic2’,3’-CMP的能力確定) 。 | ||
■ 性質(zhì) | ||
分子量:約52,000 等電點:5.0 最適pH:pH6~9 最適溫度:25℃~50℃ 激活劑:還原劑DTT(貯存Buffer中至少含有1 mM DTT,以保護處于游離狀態(tài)的-SH)。 穩(wěn)定性:起泡或劇烈攪拌 (Vortex等) 可能會引起失活。65℃熱處理15分鐘可使其失活。 |
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■ 使用注意 | ||
1. 抑制RNase活性的pH值范圍較廣,在pH7~8時表現(xiàn)最適范圍。 2. RNase Inhibitor發(fā)揮活性作用需要至少1 mM的DTT。 |
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■ 用途 | ||
1. cDNA合成反應(yīng) (Ribonuclease Inhibitor, 反應(yīng)量0.5 U/μl) 。 2. 體外翻譯 (Ribonuclease Inhibitor, 反應(yīng)量1 U/μl) 。 3. 體外無細胞系統(tǒng)轉(zhuǎn)錄 (Ribonuclease Inhibitor, 反應(yīng)量20 U/μl) 。 4. SP6或T7 RNA聚合酶的體外轉(zhuǎn)錄 (Ribonuclease Inhibitor,反應(yīng)量1 U/μl) 。 5. 多核糖體分離(RNase Inhibitor,反應(yīng)量1 U/μl)。 |
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頁面更新:2023-12-01 14:55:41