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當前位置：首頁> 產品選擇指南 > 一般PCR相關制品 > RT-PCR試劑盒 > 高保真RT-PCR試劑盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
高保真RT-PCR試劑盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
品牌 Code No. 產品名稱 包裝量 價格（元） 說明書 數量
Takara R026A PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 50 Rxns ￥1,857
Takara R026B (A × 4) PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 50 Rxns × 4 ￥6,703
無標題文檔
 
 
RNA提取試劑 RT-pcr試劑 DNA Markers PCR儀器
 
 
■ 制品內容 (Code No.: R026A)
PrimeScript II RT Enzyme Mix 50 μl
PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR 200 μl
2 × One Step High Fidelity Buffer 625 μl × 2
Control F-1 Primer*1 (20 μM) 10 μl
Control R-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 625 μl × 2
   
*1 Positive Control RNA用上游引物。
*2 Positive Control RNA用下游引物。
 
圖1. Control RNA: 使用Control Primer時擴增的DNA片段
 
■ 制品說明
PCR（Polymerase Chain Reaction；聚合酶鏈式反應）是一種使用兩種引物擴增目的DNA的方法。雖然原理上PCR法是擴增DNA，RNA不能直接被擴增，但是經過反轉錄酶的作用將RNA反轉錄成cDNA后擴增（RT-PCR），PCR法便可應用于RNA的解析了。目前，此方法已廣泛應用于RNA的構造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表達解析等多種領域。
PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit是在一個反應管中連續(xù)進行反應的1 step RT-PCR用試劑盒。反轉錄酶使用延伸性能好且能夠合成全長cDNA的PrimeScript II RTase，PCR使用準確性高且適于擴增長鏈及GC Rich cDNA的PrimeSTAR® GXL DNA Polymerase，這兩種酶經優(yōu)化后可用于1 step RT-PCR。
本試劑盒可用于寬泛濃度RNA起始的反應，在反轉錄反應10分鐘、PCR反應延伸時間為10秒/kb的高速條件下，能夠擴增難擴增的長鏈及GC rich等各種目的基因，可簡便快速且準確地獲得cDNA產物。

本試劑盒具有以下優(yōu)點：
· 使用單管反應，降低污染的風險，可準確且簡便地擴增RNA起始的目的基因。
· 反轉錄反應只需10分鐘，PCR延伸時間達10秒/kb的高速反應。
· 可擴增GC rich、長鏈cDNA。
· 反應中total RNA的使用量范圍廣，易于使用。
本試劑盒含有RNA起始合成cDNA及經PCR擴增cDNA所需的全部試劑。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 試劑盒特點
       RNA模板   適用于所有RNA
       擴增片段大小   ～8 kb
       反轉錄酶   PrimeScript II RTase (使用溫度45℃)
       DNA Polymerase   PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR
       RNase Inhibitor   必須使用 (PrimeScript II RT Enzyme Mix 中含有)
1st strand cDNA合成用引物   使用特異性下游引物 (PCR擴增反應用反義鏈引物)
  (不可使用 Random 6 mers 及 Oligo dT Primer)
       操作   在一個反應管中連續(xù)的進行RT-PCR反應
 
■ 使用注意
以下為使用本試劑盒時的注意事項，使用前一定認真閱讀。
1. 當同時需要進行多個RT-PCR 反應時，應先配制各種試劑的混合液（Master Mix；其中包括 RNase Free dHH2O、Buffer、dNTP Mixture 等），然后再分裝到每個反應管中。這樣，可使所取的試劑體積更準確，減少試劑損失，避免重復分取同一試劑。同時也可以減少實驗操作或實驗之間產生的誤差。
2. 使用PrimeScript II RT Enzyme Mix、PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR等酶類產品時，應輕輕混勻，避免起泡；分取之前要小心地離心收集到反應管底部；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取時應慢慢吸取。
3. 2 × One Step High Fidelity Buffer使用前需充分vortex后，離心備用。
4. 酶制品應在實驗前才從-20℃中取出，使用后也應立即放入-20℃保存。
5. 為了防止Positive Control RNA分解，應盡量避免反復凍融，建議將其分成小包裝后凍存。有條件的實驗室最好保存于-70℃～-80℃。
6. 分裝試劑時務必使用新的槍頭（Tip），以防止樣品間污染。
7. 本試劑盒的反轉錄反應使用基因特異性引物。不要使用Random Primer或Oligo-dT Primer。
 
 
 

頁面更新：2023-11-01 16:33:03

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