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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

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感受態(tài)細胞制備試劑盒Competent Cell Preparation Kit
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價格（元） 說明書 數(shù)量
Takara 9139 Competent Cell Preparation Kit 200 Rxns ￥196
 
■ 制品內(nèi)容 (200 次量)
Solution A 20 ml
Solution B 20 ml
 
■ 制品說明
大腸桿菌經(jīng)過處理后可以攝取外源DNA (Plasmid DNA、Phage DNA等)，處于這種狀態(tài)的細胞稱為感受態(tài)細胞 (Competent Cell)。在基因工程實驗中，經(jīng)常要使用各種感受態(tài)細胞進行DNA的轉(zhuǎn)化操作。
實驗使用的感受態(tài)細胞的來源大體可以分為兩種：一種是購買商品化的感受態(tài)細胞，但商品化感受態(tài)細胞成本高、運輸及保存有一定困難 (超低溫)；另一種是自己制備感受態(tài)細胞，實驗人員自己制作感受態(tài)細胞時，往往受到各種試劑及實驗條件等限制，制備的感受態(tài)細胞效率低，達不到實驗要求。
Competent Cell Preparation Kit是一種方便、高效、快速制備感受態(tài)細胞的試劑盒。使用本試劑盒制備的感受態(tài)細胞可以滿足大多數(shù)實驗的需要，并且適用于大多數(shù)常用的大腸桿菌，例如：E.coli DH5α、JM109、CJ236、HB101、MV1184、BMH71-18mutS等，轉(zhuǎn)化效率均可以達到1×106 cfu/μg pUC19以上 (轉(zhuǎn)化效率根據(jù)大腸桿菌細胞系及轉(zhuǎn)化用DNA不同稍有差異)。使用本試劑盒制備的感受態(tài)細胞可以在-80℃保存一年。
 
■ 保存
4℃。
 
■ 注意事項
1. 制作感受態(tài)細胞時應(yīng)使用專用的玻璃器皿或塑料容器。洗刷這些玻璃器皿或塑料容器時應(yīng)盡量洗凈。由于微量的洗滌劑或污染物都可能降低感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率，因此在洗刷完用于制作感受態(tài)細胞的專用玻璃器皿或塑料容器后，建議用去離子水浸泡一晚，然后再充分洗凈。
2. 制作感受態(tài)細胞時使用的菌種，不應(yīng)使用4℃或常溫保存的傳代細菌。應(yīng)使用-70℃保存的菌種，在LB/抗生素平板培養(yǎng)基上分級劃線培養(yǎng)后，挑取單菌落。使用這種菌種制作的感受態(tài)細胞，能提高轉(zhuǎn)化效率。
3. 培養(yǎng)感受態(tài)細胞制備用菌體時，OD600值的測定應(yīng)隨時進行，以使OD600值控制在0.35～0.5之間。如果OD600值超出此范圍，可能降低感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率。
4. 用于感受態(tài)細胞制備的菌體培養(yǎng)停止后要立即處理，不要將培養(yǎng)液過長時間室溫放置，在冰中放置時也不要時間過長。
5. 感受態(tài)細胞的制備操作過程中，離心后棄上清時要盡量棄盡，否則會降低感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率。
6. 使用Solution A、Solution B懸浮沉淀時要用手指輕輕彈動Microtube管壁，禁止劇烈振蕩操作。
7. 為了有效確認感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率，建議制作一批高純度的質(zhì)粒DNA分裝低溫 (-20℃) 保存，用作陽性對照，以確認每批制作的感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率。
 
 

頁面更新：2024-01-25 14:26:01

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