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產品選擇指南

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當前位置:首頁> 產品選擇指南 > 基因組編輯相關制品 > CRISPR/Cas9 > 基因編輯后突變檢測
基因編輯后突變檢測
品牌 Code No. 產品名稱 包裝量 價格(元) 說明書 數量
Clontech 631443 Guide-it Mutation Detection Kit 100 Rxns ¥6,172
Clontech 631448 Guide-it Mutation Detection Kit 25 Rxns ¥2,791
無標題文檔
 
 
          基因敲除    
          編輯效率檢測 細胞基因型確認 Indel序列確認
sgRNA設計工具 sgRNA合成及篩選 CRISPR-Cas9導入方法            
  基因敲入        
          基因敲入檢測        
 
 
Guide-it突變檢測試劑盒可以用于確認由CRISPR/Cas9、鋅指核酸酶(ZFNs)、轉錄激活因子樣效應物核酸酶(TALENs)等工程核酸酶所導入的基因突變。本試劑盒采用簡單的PCR方法即可簡便快速地檢測出基因突變。性能卓越的 Terra PCR Direct Polymerase Mix可直接以細胞為起始進行擴增,無需提取基因組DNA。擴增產物經過變性及退火處理后形成不完全匹配DNA,Guide-it解離酶會剪切錯配DNA部分,之后通過瓊脂糖凝膠電泳確認剪切產物。
 
■ 特點
· 識別哺乳動物細胞中插入或者缺失突變的簡便方法
· 可直接以細胞為起始進行PCR擴增,與同類產品相比較更為快速有效
· 完整試劑盒: 包含Guide-it Resolvase、Terra PCR Direct Polymerase和所有緩沖液
· 規(guī)格: 可提供100次和25次反應規(guī)格,25次反應規(guī)格可用于小規(guī)?;蚓庉媽嶒?
· 可用于CRISPR/Cas9、ZFNs、TALENs下游研究突變序列確認
 
■ 操作流程

 
■ 實驗例
 

圖1. 比較Guide-it和Surveyor方法。轉染表達Cas9核酸酶的質粒和特異作用于AAVS1位點的sgRNA至293T細胞,轉染48 hr 后收集細胞,將其與未經轉染的細胞按照不同比例*進行混合,分別進行突變導入檢測。采用Terra PCR Direct Polymerase Mix擴增含有AAVS1位點的目的片段并純化其產物,之后分別采用Guide-it解離酶和Cel1酶(Surveyor assay)進行剪切。采用Guide-it解離酶剪切后條帶清新易于識別,而Surveyor assay剪切后則顯示明顯的彌散,這樣使得不容易測定突變效率并且低水平突變導入很難檢測得到。*泳道1-6 : 100%, 80%, 60%, 40%, 20%, 0%(轉染細胞的比例)

 
 
■ 產品組份
  100 次(產品編號 631443) 25 次(產品編號 631448)
 Extraction Buffer 1 5 ml × 4    5 ml
 Extraction Buffer 2      2 ml 500 μl
 Guide-it Resolvase   100 μl  25 μl
 Terra PCR Direct Polymerase Mix (1.25 U/μl)   100 μl  25 μl
 2 × Terra PCR Direct Buffer (with Mg2+, dNTP) 1 ml × 3 750 μl
  PCR-Grade Water 1 ml × 5    1 ml
 
■ 保存
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■ 關聯資料
Guide-it 突變檢測試劑盒宣傳頁:
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頁面更新:2021-03-11 09:21:22