| 重組Cas9蛋白質(zhì) (3 μg/μl) | ||||||
| 品牌 | Code No. | 產(chǎn)品名稱 | 包裝量 | 價格（元） | 說明書 | 數(shù)量 |
| Clontech | 632640 | Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) | 3 × 100 μg | ￥7,767 |
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| Clontech | 632641 | Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) | 100 μg | ￥3,065 |
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| Guide-it Recombinant Cas9 (Electroporation Ready)（Code No. 632641/632640）產(chǎn)品名稱變更為Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) ，產(chǎn)品內(nèi)容沒有發(fā)生變化。（2021年5月） | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 降低脫靶效應(yīng)，可用于in vivo基因編輯實驗 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Guide-it™ Recombinant Cas9 (3 μg/μl) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| · 適用于電穿孔方法的低甘油含量、高濃度的Cas9蛋白質(zhì)溶液 · 與質(zhì)粒導(dǎo)入系統(tǒng)相比較，脫靶效應(yīng)受到明顯抑制 · NLS（核定位信號）有助于實現(xiàn)快速高效突變導(dǎo)入 · 與Guide-it Complete sgRNA Screening System組合使用實現(xiàn)高效率的基因編輯 |
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| ■ 產(chǎn)品說明： | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）是來源于野生型釀膿鏈球菌Streptococcus pyogenes，適用于CRISPR/Cas9基因編輯實驗的重組Cas9蛋白質(zhì)溶液。 高濃度Cas9蛋白質(zhì)溶液中甘油濃度比其他公司低，特別適用于電穿孔導(dǎo)入方法。與借助質(zhì)粒導(dǎo)入Cas9基因序列方法相比較，避免了殘留Cas9基因的持續(xù)表達，有效抑制了脫靶效應(yīng)。 無需經(jīng)過蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄·翻譯·表達過程，C末端的NLS（核定位信號）可以實現(xiàn)快速有效的突變導(dǎo)入。 Cas9導(dǎo)入細胞首先需要形成Cas9-sgRNA核糖核蛋白復(fù)合物，sgRNA制備推薦使用Guide-it sgRNA In VitroTranscription Kit（Code No. 632635）或者Guide-it Complete sgRNA Screening System（Code No. 632636）。 |
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| ■ 實驗例： | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 圖1. AAVS1或者CXCR4基因同源重組修復(fù)（HDR）效率 Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）和修復(fù)模板復(fù)合物通過電穿孔的方式導(dǎo)入至CD34＋造血干細胞中檢測同源重組修復(fù)（HDR）效率。將包含Hind III酶切位點的修復(fù)模板插入至AAVS1 基因中，包含Hind III和BamH I酶切位點的修復(fù)模板插入至CXCR4基因中。之后通過對細胞內(nèi)靶基因進行PCR擴增和限制酶剪切分析，確認突變導(dǎo)入效率。基因編輯效率標(biāo)注在凝膠陽性孔處。在基因編輯前野生型CXCR4基因已包含1處BamH I位點，因此BamH I剪切CXCR4基因后額外多顯示一條條帶。 |
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| 圖2. 不同公司Cas9產(chǎn)品在hiPS細胞中基因敲除效率比較 剪切后電泳條帶的強弱可以半定量估計發(fā)生基因編輯細胞的百分?jǐn)?shù)。Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）與Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit制備的sgRNA相結(jié)合，通過電穿孔的方法導(dǎo)入Cellartis hiPSC-18細胞，采用Guide-it Mutation Detection Kit（Code No. 631448）確認突變導(dǎo)入效率，％即表示基因編輯效率。如圖所示，Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）在多數(shù)靶基因位點均顯示有效的基因編輯。 |
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| * 比較結(jié)果來自于Takara Bio USA, Inc. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ■ 濃度 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3 μg/μl | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ■ 保存 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| －70℃ （注意）避免反復(fù)凍融。首次溶解之后，建議按照使用量分裝保存。 |
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| ■ 所需要的其它產(chǎn)品（主要產(chǎn)品） | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| · 電穿孔裝置： Neon Transfection System（Thermo Fisher Scientific）或者 4-D Nucleofector System（Lonza） *各裝置的導(dǎo)入條件請閱讀使用說明書。 · sgRNA制備及篩選 Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit（Code No. 632635）：用于sgRNA制備及純化 Guide-it Complete sgRNA Screening System（Code No. 632636）：用于確認制備的sgRNA的有效性 |
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產(chǎn)品詳情請點擊： |
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頁面更新：2021-07-19 12:52:26
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