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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

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大腸桿菌DNA連接酶E.coli DNA Ligase
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價(jià)格(元) 說明書 數(shù)量
Takara 2161 E.coli DNA Ligase 1,000 U ¥166
 
■ 制品內(nèi)容
Code No.: 2161  
E.coli DNA Ligase (60 U/μl) 1,000 Units
10X E.coli DNA Ligase Buffer 100 μl
10X BSA (0.05%)* 100 μl
* BSA在-20℃下易產(chǎn)生沉淀,應(yīng)盡量避免多次反復(fù)凍融。短期使用請?jiān)?℃下保存。產(chǎn)生稍許沉淀不影響反應(yīng)效果。
 
■ 制品說明
本酶催化相鄰DNA鏈的5′-P末端和3′-OH末端以磷酸二酯鍵結(jié)合的反應(yīng),與T4 DNA Ligase作用相同。分子量為77,000,最適反應(yīng)pH為7.5-8.0 (Tris-HCl buffer)。反應(yīng)需NAD作輔酶。與T4 DNA Ligase可連接粘性末端和平末端相比,本酶只能催化突出末端DNA之間的連接,但如果在PEG及高濃度一價(jià)陽離子存在的條件下,也能連接平滑末端的DNA。與T4 DNA Ligase能將DNA的5′-P末端與RNA的3′-OH以及RNA的5′-P末端與DNA的3′-OH連接不同,本酶不能催化DNA與RNA以及RNA之間的連接。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli UT481 carrying the plasmid encoding the ligase
 
■ 活性定義
在20 μl的連接反應(yīng)體系中,6 μg的λ DNA-Hind III在16℃下反應(yīng)30分鐘時(shí),有90%以上的DNA片段被連接所需要的酶量定義為一個活性單位 (U)。
 
■ 用途
Okayama-Berg法克隆cDNA,實(shí)驗(yàn)操作中酶的用量約為50 units。
 
■ 使用注意
本酶由大腸桿菌克隆體精制而成,雜質(zhì)很少,是純度很高的制品。因此,即便是高濃度制品,大量使用也完全沒有問題。
 
 

頁面更新:2024-01-31 15:45:14

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